• 依據(jù)檢測(cè)區(qū)域的取樣點(diǎn)數(shù)，按照《培養(yǎng)基配制、滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作程序》制備適量的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

• 在超凈工作臺(tái)內(nèi)，以無(wú)菌操作法將配制好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15ml的裝量分裝，待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。

• 將制備的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30～35℃培養(yǎng)48小時(shí)。取出逐個(gè)檢查，確認(rèn)無(wú)菌落數(shù)后即可使用。

將上述制備好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿交與QA人員取樣。

浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿（φ90mm×15mm）、培養(yǎng)基（營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）、恒溫培養(yǎng)箱

浮游菌采樣器必須要有流量計(jì)和定時(shí)器。應(yīng)嚴(yán)格按儀器說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行操作。采樣器必須按儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定，以保證測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性，檢驗(yàn)項(xiàng)目有：定時(shí)器，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速，流量計(jì)。每次測(cè)試前應(yīng)先接通電源，啟動(dòng)真空抽氣泵，然后調(diào)節(jié)流量計(jì)和定時(shí)器。空氣采樣量根據(jù)需要選定，已知采樣器的流量（L/min）,設(shè)定采樣時(shí)間（min）兩者相乘即得采樣量（L）。采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造，采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑，采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)定點(diǎn)的高度定，盡量減少?gòu)澢��?/span>

測(cè)試用儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒劑滅菌。用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂盤(pán)、轉(zhuǎn)盤(pán)以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤(pán)。采樣口及采樣管使用前必須高溫滅菌，如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁、內(nèi)壁進(jìn)行消毒，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤(pán)上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。

儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣品縫隙高度。置采樣器于采樣點(diǎn)后，開(kāi)啟采樣器、轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。

浮游菌測(cè)試前微生物限度檢查室已經(jīng)消毒過(guò)。測(cè)試狀態(tài)為靜態(tài)測(cè)試，并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。

測(cè)試人員必須穿戴符和被測(cè)環(huán)境級(jí)別的工作服。靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)人員不得多于2人。

對(duì)單向流，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10min后開(kāi)始。對(duì)非單向流，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開(kāi)始。

最少采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置，最小采樣量，見(jiàn)下表:

工作區(qū)測(cè)點(diǎn)位置離地0.8m～1.5m左右，送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開(kāi)送風(fēng)面30cm左右；可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。對(duì)于單向流或送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流，采樣管口向上。布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)離開(kāi)塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)。

取樣結(jié)束后將平皿復(fù)倒置隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30～35℃培養(yǎng)48小時(shí)。并以未采樣的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿作對(duì)照皿。

菌落計(jì)數(shù)：用肉眼直接計(jì)數(shù)，然后用5-10倍放大鏡檢查，是否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上菌落重疊，可分辨時(shí)，仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。培養(yǎng)結(jié)束，將上述培養(yǎng)后的平皿取出，逐個(gè)點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，必要時(shí)用放大鏡檢查，并記錄。

平均菌落數(shù)的計(jì)算見(jiàn)下式：

式中：

m為該房間（或區(qū)域）的平均菌落數(shù)；

m1、m2‥‥‥mn為該房間（或區(qū)域）各取樣點(diǎn)的菌落數(shù)；

N為培養(yǎng)皿總數(shù)

記錄：測(cè)試報(bào)告中應(yīng)記錄房間溫度、相對(duì)濕度、壓差、測(cè)試狀態(tài)及測(cè)試數(shù)據(jù)。