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你會(huì)平板劃線嗎？
也許你會(huì)說這個(gè)誰(shuí)不會(huì)
但是，你的平板劃線標(biāo)準(zhǔn)嗎？
或者說藝術(shù)嗎？
什么。。。還要藝術(shù)？？?
作為微生物檢測(cè)人員必須具備的基本技能之一
掌握標(biāo)準(zhǔn)的平板劃線
是每一個(gè)微生物工作者都應(yīng)該做到的,
但是把平板劃線做的漂亮卻不是每一個(gè)人都能做到的，
今天就和大家好好聊聊
如何將平板劃線做成一門藝術(shù)
平板劃線分離法是把混雜在一起的微生物或同一種微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生成繁殖成單菌落。其原理是將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次做“由點(diǎn)到線”稀釋而達(dá)到分離目的。
首先給大家展示一下平板劃線的標(biāo)準(zhǔn)范例
人家劃出的平板是這樣的
這樣的
當(dāng)然還有這樣的
這都是別人家的平板，
是不是很有藝術(shù)氣息，
是不是很美！
然而現(xiàn)實(shí)情況很多是這樣的：
還有這樣的
其實(shí)微生物檢測(cè)也是一項(xiàng)很富有藝術(shù)氣息的工作
你是不是也想劃出那些標(biāo)準(zhǔn)的平板呢？
一起學(xué)起來(lái)吧！
將接種環(huán)2支，酒精燈2個(gè)，打火機(jī)2個(gè)，無(wú)菌平板兩包，酒精棉球2瓶，鑷子2個(gè)，潔凈燒杯2個(gè)置于超凈工作臺(tái)，打開紫外燈，滅菌30分鐘。
取待純化菌種2支放入超凈工作臺(tái)。操作者直立坐于操作臺(tái)前，打開操作臺(tái)玻璃，高度可供雙手順利出入即可。
用鑷子取酒精棉球擦拭雙手，在超凈工作臺(tái)門口處，并將臺(tái)面擦出與肩同寬的正方形區(qū)域，此區(qū)域即為操作區(qū)域。將用畢的棉球放入燒杯中。
將酒精燈放于擦拭區(qū)域的中心，將接種環(huán)放于酒精燈的右側(cè)，將菌種放于酒精燈的左側(cè)，將無(wú)菌平板的包裝除去，包裝置于操作區(qū)外，無(wú)菌平板置于酒精燈左側(cè)。
打開酒精燈蓋，將蓋扣于離開操作區(qū)的臺(tái)面上，點(diǎn)燃酒精燈，酒精燈周圍3-5cm之內(nèi)即為無(wú)菌區(qū)。
右手持接種環(huán)，將接種環(huán)的金屬絲直立于酒精燈外焰處，灼燒至紅透，然后略傾斜接種環(huán)，灼燒金屬桿，注意灼燒時(shí)要將金屬絲與金屬桿的連接部分充分灼燒。
左手持斜面的底部，將管口置于火焰的無(wú)菌區(qū)，右手小指打開試管塞，將接種環(huán)的接種絲放于外焰處再次灼燒至紅透，然后將其深入試管內(nèi)部，稍微涼一下，輕輕取一環(huán)，勿劃破培養(yǎng)基，將接種環(huán)從試管中取出，注意取時(shí)勿碰觸試管壁。將試管塞灼燒一圈，塞于試管上。因試管口一直在火焰的外焰處，故其溫度較高，塞試管塞時(shí)注意勿燙手。
左手取無(wú)菌平板一個(gè)，用拇指和食指控制皿蓋，其余幾指控制皿底，打開皿蓋，使開口角小于30°，將接種環(huán)上的菌種按圖示進(jìn)行劃線，一區(qū)法要求連續(xù)劃線，且線的邊緣應(yīng)劃至培養(yǎng)皿的內(nèi)緣，線要緊密但不相連。三區(qū)或四區(qū)法要求每劃完一區(qū)，都應(yīng)灼燒接種環(huán)，后一區(qū)要求與前一區(qū)首尾相連，但不得與其他區(qū)域搭在一起。具體的劃線順序如下圖：
將接種完畢的平板放于恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。
操作完畢后，將實(shí)驗(yàn)所需的物品放回原處，并將實(shí)驗(yàn)所產(chǎn)生的垃圾清理干凈，帶出超凈臺(tái)，放于垃圾桶中。
72小時(shí)后，觀察平板，應(yīng)無(wú)雜菌污染，若菌種不在劃線的線上則為雜菌；線應(yīng)為直的，且每一線都接近平板邊緣，平行的線和線之間要緊密，但不能搭在一起；要有較多的單菌落，至少應(yīng)有10個(gè)以上的單菌落方為合格。
