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實(shí)驗(yàn)室消毒、滅菌的方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-09-11
核心提示: (一)物理消毒滅菌法 利用物理因子殺滅微生物的方法。包括熱力消毒滅菌、輻射消毒、空氣凈化、超聲波消毒和微波消毒
 (一)物理消毒滅菌法

 

利用物理因子殺滅微生物的方法。包括熱力消毒滅菌、輻射消毒、空氣凈化、超聲波消毒和微波消毒等。

 

1.熱力消毒滅菌

 

高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和酶變性或凝固(結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致功能喪失),新陳代謝受到障礙而死亡,從而達(dá)到消毒與滅菌的目的。在消毒中,熱可分為濕熱與干熱兩大類(lèi)。

 

2.干熱消毒滅菌

 

干熱是指相對(duì)濕度在20%以下的高熱。干熱消毒滅菌是由空氣導(dǎo)熱,傳熱效果較慢。一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時(shí)可以殺死,芽胞需160-170℃經(jīng)2小時(shí)方可殺死。

 

(1)燃燒法。是一種簡(jiǎn)單、迅速、徹底的滅菌方法,因?qū)ξ锲返钠茐男源,故?yīng)用范圍有限。

 

燒灼法:一些耐高溫的器械(金屬、搪瓷類(lèi)),在急用或無(wú)條件用其他方法消毒時(shí)可采用此法。將器械放在火焰上燒灼1-2分鐘。若為搪瓷容器,可倒少量95%乙醇,慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)容器,使乙醇分布均勻,點(diǎn)火燃燒至熄滅約1-2分鐘。采集作細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本時(shí),在留取標(biāo)本前后(即啟蓋后,閉蓋前)都應(yīng)將試管(瓶)口和蓋子置于火焰上燒灼,來(lái)回旋轉(zhuǎn)2-3次。

 

燃燒時(shí)要注意安全,須遠(yuǎn)離易燃易爆物品,如氧氣、汽油、乙醚等。燃燒過(guò)程不得添加乙醇,以免引起火焰上竄而致灼傷或火災(zāi)。銳利刀剪為保護(hù)刀鋒,不宜用燃燒滅菌法。

 

焚燒:某些特殊感染,如破傷風(fēng)、氣性壞疽、綠膿桿菌感染的敷料,以及其它已污染且無(wú)保留價(jià)值的物品,如污紙、垃圾等,應(yīng)放入焚燒爐內(nèi)焚燒,使之炭化。

 

(2)干烤法

 

 電熱培養(yǎng)箱:利用培養(yǎng)箱的熱空氣消毒滅菌。培養(yǎng)箱通電加熱后的空氣在一定空間不斷對(duì)流,產(chǎn)生均一效應(yīng)的熱空氣直接穿透物體。一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時(shí)可以殺死,芽胞、病毒需160-170℃經(jīng)2小時(shí)方可殺死。熱空氣消毒滅菌法適用于玻璃器皿、瓷器以及明膠海棉、液體石臘、各種粉劑等。滅菌后待箱內(nèi)溫度降至50-40℃以下才能開(kāi)啟柜門(mén),以防炸裂。

 

微波消毒:微波是一種高頻電磁波,其殺菌的作用原理,一為熱效應(yīng),所及之處產(chǎn)生分子內(nèi)部劇烈運(yùn)動(dòng),使物體里外濕度迅速升高;一為綜合效應(yīng),諸如化學(xué)效應(yīng)、電磁共振效應(yīng)和場(chǎng)致力效應(yīng)。目前已廣泛應(yīng)用于食品、藥品的消毒,用微波滅菌手術(shù)器械包、微生物實(shí)驗(yàn)室用品等亦有報(bào)告。若物品先經(jīng)1%過(guò)氧乙酸或0.5%新潔爾滅濕化處理后,可起協(xié)同殺菌作用,照射2分鐘,可使殺芽胞率由98.81%增加到99.98%-99.99%。  

 

微波對(duì)人體有一定危害性,其熱效應(yīng)可損傷睪丸、眼睛晶狀體等,長(zhǎng)時(shí)間照射還可致神經(jīng)功能紊亂。使用時(shí)可設(shè)置不透微波的金屬屏障或戴特制防護(hù)眼鏡等。

 

3.濕熱消毒滅菌

濕熱消毒滅菌是由空氣和水蒸氣導(dǎo)熱,傳熱快,穿透力強(qiáng),濕熱滅菌法比干熱滅菌法所需溫度低、時(shí)間短。

 

(1)煮沸法。將水煮沸至100℃,保持5-10分鐘可殺滅繁殖體,保持1-3小時(shí)可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1%-2%濃度時(shí),沸點(diǎn)可達(dá)105℃,能增強(qiáng)殺菌作用,還可去污防銹。在高原地區(qū)氣壓低、沸點(diǎn)低的情況下,要延長(zhǎng)消毒時(shí)間(海拔每增高300m,需延長(zhǎng)消毒時(shí)間2分鐘)。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類(lèi)物品。

 

煮沸前物品涮洗干凈,打開(kāi)軸節(jié)或蓋子,將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊,以確保物品各面與水接觸。銳利、細(xì)小、易損物品用紗布包裹,以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類(lèi)放入冷水或溫水中煮;金屬、橡膠類(lèi)則待水沸后放入。消毒時(shí)間均從水沸后開(kāi)始計(jì)時(shí)。若中途再加入物品,則重新計(jì)時(shí),消毒后及時(shí)取出物品,保持其無(wú)菌狀態(tài)。

 

(2)高壓蒸汽滅菌法。高壓蒸汽滅菌器裝置嚴(yán)密,輸入蒸汽不外逸,溫度隨蒸汽壓力增高而升高,當(dāng)壓力增至103-206kPa時(shí),濕度可達(dá)121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌,為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓,不怕潮濕的物品,如敷料、手術(shù)器械、藥品、細(xì)菌培養(yǎng)基等。潛熱是指當(dāng)lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時(shí),釋放出2255.2J的熱量。

 

高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵問(wèn)題是為熱的傳導(dǎo)提供良好條件,而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因?yàn)槔淇諝鈱?dǎo)熱性差,阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品,并且還可減低蒸汽分壓使之不能達(dá)到應(yīng)有的溫度。

 

手提式高壓蒸汽滅菌器:為金屬圓筒,分為二層,隔層內(nèi)盛水,有蓋,可以旋緊,加熱后產(chǎn)生蒸汽。鍋外有壓力表,當(dāng)蒸汽壓力升高時(shí),溫度也隨之相應(yīng)升高。該滅菌器體積小,可自發(fā)蒸汽,便于攜帶。

 

操作方法如下:在滅菌器中盛水3000mL;將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內(nèi);將蓋子上的排氣軟管插于鋁桶內(nèi)壁的方管中;蓋好蓋子,擰緊元寶螺絲,勿使漏氣;鍋下加熱,打開(kāi)排氣活門(mén),放出冷空氣(一般在水沸后排氣10-15分鐘左右),關(guān)閉放氣活門(mén),使壓力逐漸上升至103kPa,溫度達(dá)121.3℃,維持20分鐘后,排氣至“0”時(shí),慢慢打開(kāi)蓋子。如果突然開(kāi)蓋,冷空氣大量進(jìn)入,蒸汽凝成水滴,使物品潮濕,且玻璃類(lèi)易發(fā)生爆裂。后再關(guān)閉放氣開(kāi)關(guān),待夾層壓力表達(dá)到滅菌所需壓力時(shí)(約10分鐘后),將蒸汽控制閥移至“消毒”位置,使蒸汽進(jìn)入柜室 ,柜室內(nèi)的冷空氣及冷凝水可由柜室阻氣器排出,待柜室的壓力升到103-137kPa,溫度達(dá)121.3-126.2℃時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)壓力調(diào)節(jié)閥,使壓力與溫度保持恒定。維持30分鐘后,將蒸汽控制閥移至“排氣”位置,排氣畢,將蒸汽控制閥移至“干燥”位置;物品干燥后,將蒸氣控制閥移至“關(guān)閉”位置,待壓力指針到“0”位置和熱空氣排盡后,才能打開(kāi)柜門(mén),取出物品;關(guān)緊進(jìn)氣閥。  

 

臥式高壓蒸汽滅菌器:其結(jié)構(gòu)原理同手提式高壓蒸汽滅菌器,因其體積大,一次可滅菌大量物品。操作人員須經(jīng)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn),合格后方能上崗。

 

預(yù)真空式高壓蒸汽滅菌器:在通入蒸汽前有一預(yù)處理階段,即柜室內(nèi)抽負(fù)壓至2.6kPa(空氣排除約98%),所以,預(yù)真空高壓蒸汽滅菌器除有下排氣式所具備的滅菌系統(tǒng)、蒸汽輸送系統(tǒng)、控制系統(tǒng)、安全系統(tǒng)和儀表監(jiān)測(cè)指示系統(tǒng)外,增加抽負(fù)壓系統(tǒng)和空氣過(guò)濾系統(tǒng)。機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)由電腦控制。

 

4.紫外線(xiàn)消毒

 

在室溫20℃~25℃時(shí),220V、30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7nm紫外線(xiàn)輻射強(qiáng)度應(yīng)70W/cm2,低于此值時(shí)應(yīng)更換,適當(dāng)數(shù)量的紫外燈,確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線(xiàn)消毒時(shí),無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。在無(wú)人條件下,可采取紫外線(xiàn)消毒,作用時(shí)間應(yīng)30min,室內(nèi)濕度20%或40%、相對(duì)濕度大于60%時(shí),應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。用紫外線(xiàn)消毒物品表面時(shí),應(yīng)使照射表面受到紫外線(xiàn)的直接照射,且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量。人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。

 

5.臭氧消毒

 

封閉無(wú)菌室內(nèi),無(wú)人條件下,采用20mg/m3濃度的臭氧,作用時(shí)間應(yīng)30min。消毒后室內(nèi)臭氧濃度0.2mg/m3時(shí)方可入內(nèi)作業(yè)。

 

(二)化學(xué)試劑消毒

 

(1)甲醛消毒:按照甲醛(40%)10毫升/立方米、高錳酸鉀5克/立方米計(jì)算用量。不同情況下,用量有所不同,但比例為2:1。盛藥容器要大、耐熱、耐腐蝕:一般用陶瓷或玻璃容器,因?yàn)楦咤i酸鉀和甲醛都具有腐蝕性,且混合后反應(yīng)劇烈,釋放熱量。房間要密閉:這樣熏蒸效果才會(huì)好。容器應(yīng)盡量靠近門(mén),以便操作人員迅速撤離;先將溫水倒入容器內(nèi),后加入高錳酸鉀,攪拌均勻;再加入甲醛;加入甲醛后人立即離開(kāi),密閉房間。注意順序:是將甲醛倒入高錳酸鉀溶液內(nèi)。消毒時(shí)間一般為20-30分鐘。消毒后要打開(kāi)門(mén)窗通風(fēng)換氣。

 

這里說(shuō)的甲醛就是40%的甲醛溶液,也就是福爾馬林,一般包裝上寫(xiě)的是37%。缺點(diǎn):甲醛對(duì)人體危害太大了,一般不推薦這種方法。可以考慮用40%乳酸熏蒸,效果很不錯(cuò)的。

 

2)乳酸重蒸法消毒:室內(nèi)溫度22 ℃,濕度75%~90%,按0.6g/m3乳酸量共用9.6g進(jìn)行室內(nèi)熏蒸,使蒸汽彌散全室,密閉門(mén)窗1 h。

編輯:songjiajie2010

 
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