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減數(shù)分裂實驗原理和步驟

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-08-29  來源:實驗室資訊網(wǎng)
核心提示:一、目的 學(xué)習(xí)生殖細(xì)胞的取材和染色體制片,認(rèn)識減數(shù)分裂各時期的形態(tài)特征。二、原理 生物秀細(xì)胞實驗論壇交流 減數(shù)分裂是形成生
 一、目的
    學(xué)習(xí)生殖細(xì)胞的取材和染色體制片,認(rèn)識減數(shù)分裂各時期的形態(tài)特征。
二、原理 生物秀細(xì)胞實驗論壇交流
    減數(shù)分裂是形成生殖細(xì)胞的一種特殊方式的細(xì)胞分裂。它是遺傳學(xué)中一個特別重要的事件,是維持大多數(shù)動植物品種染色體數(shù)目世代穩(wěn)定傳遞的根本機(jī)制。同時,基因的分離、自由組合以及交換無不是通過減數(shù)分裂發(fā)生的?梢哉f減數(shù)分裂是經(jīng)典遺傳學(xué)的根本,動植物都是通過減數(shù)分裂形成配子,所以減數(shù)分裂通常以植物的花粉母細(xì)胞或動物的精巢、卵巢作材料進(jìn)行觀察。減數(shù)分裂的特點是:連續(xù)進(jìn)行兩次核分裂,而染色體僅復(fù)制一次,從而形成四個只含單倍數(shù)染色體的產(chǎn)物——生殖細(xì)胞(或配子)。
三、材料
1.  小麥雄花序。
2.  蝗蟲精巢。
四、器具和試劑
    鑷子、解剖刀、解剖針、載玻片、蓋玻片、酒精燈、吸水紙、滴瓶、皮頭鉛筆、火柴、顯徽鏡。
    卡諾氏固定液,改良苯酚品紅、70%酒精。
五、步驟 生物秀細(xì)胞實驗論壇交流
(一)小麥花粉母細(xì)胞涂片觀察
1.  取材和固定:當(dāng)小麥植株開始挑旗,旗葉與下一葉片的葉耳間距約3~5cm,花藥長度約2.0~2.5mm,氣溫在23℃~25℃時,將穗子剝出,在卡諾氏固定液中固定24小時。如暫不制片可轉(zhuǎn)入70%酒精中,4℃保存。
2.  大鼠細(xì)胞染色和壓片:從穗中部小穗中取出花藥若干置于載片上,切去花藥端部,滴兩滴改良苯酚品紅,用攝子擠壓花藥,使內(nèi)含物全部擠出,除去藥壁,將擠出的細(xì)胞輕輕敲打;如果花藥較小,也可滴兩滴染液后用鑷子直接將花藥搗碎,去除未碎的組織,然后蓋上蓋玻片,在酒精燈上微微加熱。用左手拇指及食指固定蓋片與載片,勿使其移動。右手拇指用力壓蓋玻片,使細(xì)胞伸展開。
3.  鏡檢:由于小麥小穗發(fā)育是以中部小穗最先發(fā)育,然后依次向上、下推移,所以在一個穗子上往往能找到減數(shù)分裂的若干時期。如果中部花藥尚未進(jìn)入減數(shù)分裂時期則需要另選一個更大的穩(wěn)于取花藥制片。
(二)蝗蟲精巢精母細(xì)胞制片觀察
1.  取材和固定:捕捉進(jìn)入繁殖期的雄性蝗蟲,剪開胸腹部體壁,放入卡諾氏固定液中固定24小時,暫不制片時,可重復(fù)固定一次,轉(zhuǎn)入70%酒精中4℃保存。
2.  制片:取蟲體剪去翅膀,在翅的基部后方,相當(dāng)于腹部前端的背側(cè),仔細(xì)剪干體壁,從精巢中前部取幾段精細(xì)管放在載片上,用解剖針?biāo)核榫?xì)管,除去大塊管壁組織,涂勻。
3.  染色觀察:加改良苯酚品紅3~5滴,染色10分鐘(必要時可在酒精燈上快速掠幾下)加上蓋片和吸水紙,以指壓法壓片。
    光鏡下,可以看到減數(shù)分裂的各個時期,以及精子的形成過程。
 
編輯:songjiajie2010

 
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