​抑菌圈

抑菌圈(Zone of inhibition)是福萊明發(fā)現(xiàn)青霉素的過程中，提出的一個(gè)詞匯。他發(fā)現(xiàn),接種了青霉的培養(yǎng)皿中，青霉的周圍不生長細(xì)菌,而在遠(yuǎn)離青霉的地方有細(xì)菌生長。不生長細(xì)菌的地方，是一個(gè)以青霉菌落為圓心的一個(gè)規(guī)則的圓，這個(gè)圓圈被福萊明稱為抑菌圈。

后來，福萊明發(fā)現(xiàn)，這個(gè)抑菌圈的出現(xiàn)與青霉分泌的青霉素有關(guān)，青霉素有殺菌的作用，將青霉周圍一定范圍內(nèi)的細(xì)菌全部殺死，所以形成了一個(gè)以青霉為圓心的沒有細(xì)菌生長的抑菌圈。

抑菌圈直徑大小以 mm 作為計(jì)量單位。

抑菌圈法

常用于抗生素產(chǎn)生菌的分離篩選。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被檢菌能分泌某些抑制工具菌生長的物質(zhì)，如抗生素等，便會(huì)在該菌落周圍形成工具菌不能生長的抑菌圈，很容易被鑒別出來。

抑菌圈實(shí)驗(yàn)說明

抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式，主要用于測定殺菌防霉劑對(duì)細(xì)菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通過殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴(kuò)散能力來初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。

用具和材料

霉菌培養(yǎng)皿，無菌吸管（或針筒），圓片濾紙（直徑50px），帶玻璃珠的無菌水，帶過濾漏斗的三角牌，鑷子，接種針（環(huán)），熔化狀態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基（最好保溫于45℃左右水浴中），一定濃度的藥劑，供試驗(yàn)用的菌種。

試驗(yàn)過程

1.用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中，用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散，過濾后制成混合孢子懸液。

2.用無菌吸管（或針筒）向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。

3.向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基（約45℃），將菌液與培養(yǎng)基混合均勻，待其冷卻。

4.用鑷子將圓片濾紙?jiān)诓煌瑵舛鹊姆烂箘┲薪�漬片刻，取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央，蓋上蓋子

5.置適宜溫度下，培養(yǎng)2~3d，觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。

注意事項(xiàng)

1.所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理，操作必須在無菌室（或無菌箱）內(nèi)于火焰旁進(jìn)行。

2.霉菌、細(xì)菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液，即這里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液，并非霉菌、細(xì)菌和酵母菌的混合液。

3.混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL.

4.倒入培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基溫度不能太高（一般為45℃左右），否則會(huì)引起微生物死亡。也不能太低，因?yàn)榄傊瑫?huì)很快凝結(jié)，以致攪拌不均勻，影響試驗(yàn)結(jié)果。

5.各種微生物的最適生長溫度不同（例如霉菌一般為25~30℃，細(xì)菌一般為32~37℃等），恒溫培養(yǎng)時(shí)宜分開放置。

結(jié)果評(píng)判

由于濾紙圓片所吸附的藥液慢慢向四周擴(kuò)散，因此在濾紙片的周圍就出現(xiàn)清晰的抑菌圈（加入該防霉劑對(duì)供試菌有抑制效果）。抑菌圈的大小代表藥劑抗菌力的高低。在一定的藥劑濃度范圍內(nèi)，藥劑的濃度越高則抑菌圈的直徑越大。此法同樣適合于測定單個(gè)菌的抗菌效果。