答：每個制備批次的培養(yǎng)基都應(yīng)測定pH，可采用pH試紙或pH計測量。

2.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固，如何測定其pH？

答：有專門的固體培養(yǎng)基pH計，如Radiometer A/S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。

3. 稀釋液滅菌后pH值是否有變化？有何影響？（如pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液） 

答：一般pH有下降現(xiàn)象，約0.2左右，不同培養(yǎng)基pH變化可能不同。 

4. 孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養(yǎng)霉菌和酵母菌？ 

答：根據(jù)中國藥典，采用玫瑰紅鈉瓊脂。

5. 配制pH值7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導致培養(yǎng)基混濁了，這種情況緩沖液還能用嗎？ 

答：建議按正常溫度滅菌，混濁培養(yǎng)基建議不要使用。

6.含瓊脂培養(yǎng)基在冷藏中形成冰晶怎么處理？銷毀還是加熱再用？

答：建議不要使用。

7.融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻？ 

答：防止受熱不均引起結(jié)塊。 

8. 滅菌后，滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開，這段時間是否會造成過度滅菌。

答：自然冷卻過程已經(jīng)計算在正常滅菌時間內(nèi)了，不會造成過度滅菌。 

9. 培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱滅菌，是否必須待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中間過程怎樣防止微生物污染？ 

答：如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實驗，不一定要烘干；否則，應(yīng)干燥后使用，滅菌及干燥盡量在同一鍋里進行，或用紗布和牛皮紙包扎緊密。

10. 培養(yǎng)基的避光儲存，是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲存？ 

答：最好都避光保存。無條件時，光敏感的培養(yǎng)基一定要。 

11. 商品培養(yǎng)基干粉說是加蒸餾水溶解，實際操作是否可以用純化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì)的水均可。

12. 培養(yǎng)基及器具滅菌可否同一設(shè)備同滅菌時間進行滅菌？

答：最好分開滅菌，條件不允許時可同爐滅菌，前提是都是潔凈無污染的。

13. 培養(yǎng)基的保溫能否用60℃的培養(yǎng)箱，它與45℃-55℃水浴鍋保溫方法有何不同？ 

答：可以用恒溫培養(yǎng)箱保溫，但保溫溫度一般是50℃左右，且時間不能過長，一般是不超過4小時。

14. 培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于2-10℃冰箱內(nèi)？ 

答：需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會寫明。

15. 培養(yǎng)基滅菌后成份會有所蒸發(fā)減少，如何處理這個問題？

答：正常情況下蒸發(fā)量較少，可忽略不計。

16. 培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的？應(yīng)如何避免？ 

答：可能的情況有:

1. 培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定；

2. 滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢；

3. 培養(yǎng)基儲存不當；

4.融化時沸騰時間較長等。

17. 準備好的培養(yǎng)基有效期如何驗證？ 

答：定期取出培養(yǎng)基驗證其無菌性，促生長能力等方面。

18. 培養(yǎng)基配制好滅菌后，在高壓容器中保溫降至50℃左右，可不可行？ 

答：建議最好不要，避免過度受熱。 

19. 脫水培養(yǎng)基對濕度是否有要求？多少適宜？ 

答：按要求室溫干燥環(huán)境儲存即可。 

20. 培養(yǎng)基pH值測定溫度在25℃，這個溫度應(yīng)怎么控制？比如固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基使用過程中還能調(diào)節(jié)pH值嗎？ 

答：可水浴控制培養(yǎng)基溫度。

21. 配制培養(yǎng)基過程中，按說明書稱定量，加規(guī)定的純化水，煮沸溶解，為了避免煮沸過程總減少水分，是否要在配制過程適當增加水?比如陪硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基. 

答：可適量增加，自己掌握。

22. 商品培養(yǎng)基一定要當天配當天用嗎？可否在一周內(nèi)用完？ 

答：不是即配即用的培養(yǎng)基的話，儲存的當，可以使用。

23. 稱量培養(yǎng)基時，注意不要吸入粉末，這粉末是指何物？ 

答：就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基 ，因為培養(yǎng)基的粉末對呼吸道有刺激作用，而且培養(yǎng)基中的某些成分，如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等，長期吸入并在體內(nèi)累積到一定量會對人體健康有危害。所以培養(yǎng)基配制稱量需做好個人防護，且最好選擇少粉塵環(huán)保型顆粒培養(yǎng)基。

24. 煮培養(yǎng)基，用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行？硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸？如何煮沸？用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎？可不可以水浴煮沸呢？ 

答：硫乙醇應(yīng)煮沸，量大時，我實驗室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸，因為水浴煮沸瓊脂粉很難溶，導致瓊脂分裝不均勻，前段分裝的瓊脂含量少，后段分裝的瓊脂含量高，導致有的管或瓶中的FT凝固。

25. 如培養(yǎng)基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎？ 

答：高溫滅菌器有安全閥，溫度下降到安全閥可打開時將培養(yǎng)基取出室溫冷卻，各型號滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。

26.平板涂布和平板劃線培養(yǎng)基表面水分過多，菌落蔓延如何解決？

答：對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基，應(yīng)先對瓊脂表面進行干燥：揭開平皿蓋，將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中（溫度設(shè)為25℃～50℃）；或放在有對流的無菌凈化臺中，直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。