在樣品前處理的實際操作中，首先，我們應(yīng)該遵循的基本原則是取樣品的可食部分進行前處理并檢驗。比如排骨樣品我們要取其中的肉，花生或核桃等堅果類的樣品我們應(yīng)該取果仁部分等。其次，還應(yīng)該考慮消費者在食用這類食品時候的一些常見的習(xí)慣，判斷這類習(xí)慣是否會食入非可食部分的微生物的可能性。比如同屬于堅果類樣品，花生、核桃等樣品需要去殼取果仁部分進行檢測，而瓜子一般情況下是帶殼進行前處理的。這是因為在食用過程中，花生核桃等一般是用手剝開果殼取出果仁食用，果殼上的微生物不太可能通過食用的途徑進入體內(nèi)；而瓜子在食用過程中，很多人是直接將瓜子放入嘴里磕開果殼食用果仁，這種食用方式會增加微生物通過食用的途徑進入體內(nèi)的可能性。第三還應(yīng)考慮前處理過程中的樣品處理的復(fù)雜程度和引入污染的風(fēng)險程度，核桃和花生等樣品比較大，去殼過程比較簡單便捷，而瓜子由于顆粒比較小，去殼檢測的難度也比較大，在操作過程中也更容易造成樣品污染。

目前食品微生物樣品的檢驗通常需要遵循二級采樣法或三級采樣法，每個檢驗項目一般也需要25g或25mL。因此在取樣過程中就應(yīng)該考慮到取樣量的問題。特別是對于含有非可食部分的樣品，用于檢驗的可食部分的樣品的含量充足，以保證每份樣品都能在前處理過程中得到足夠的樣品進行檢驗。在實際工作中，如果某種產(chǎn)品的單個包裝的樣品凈含量少于25g就需要計算好樣品數(shù)量。比如某種產(chǎn)品的單個包裝的凈含量為20g，不足25g，如果該產(chǎn)品需要檢測菌落總數(shù)，且需要進行三級采樣法檢測菌落總數(shù)（n=5），就需要將兩個獨立包裝的產(chǎn)品視作一份樣品，共計采樣10個單獨包裝，分作五份樣品。如果該產(chǎn)品需要同時檢測菌落總數(shù)和沙門氏菌，那么在此基礎(chǔ)上還應(yīng)再加倍取樣，每四個單獨包裝的產(chǎn)品視作一份樣品。當然，在取樣時必須要注意到，同一批次的產(chǎn)品才能如此操作，否則無法根據(jù)標準要求對產(chǎn)品進行檢驗和報告。

無菌操作是微生物檢驗全流程都需要注意的重要事項，尤其是在樣品的前處理階段。由于樣品通常保存在非無菌環(huán)境中，因此樣品的外包裝一般也不是無菌狀態(tài)，打開樣品包裝的過程比較容易污染樣品。在打開包裝前，使用75%的酒精對表面進行全面的消毒是最常用的方法，同時開包裝用的工具（比如剪碎或搗碎樣品的剪刀、搗碎機以及取樣用的鑷子、取樣勺等），均需要滅菌處理。

打開樣品包裝后，需要稱取（固體或半固體）或量�。ㄒ后w）一定量的樣品加入到稀釋液或增菌培養(yǎng)基中。目前食品微生物學(xué)檢驗系列標準（以下稱GB4789系列）要求的樣品量一般都是25g/mL。對于量取液體樣品，由于使用的移液管或移液器，可以較為準確的量取25mL，但對于固體和半固體樣品，如何準確的稱取25g就是一個比較麻煩的問題。鑒于目前GB4789系列標準中要求的天平感量都是0.1g，并且標準中只給出了25g這一數(shù)值，而不是一個稱量范圍，那么是不是就意味著我們必須要準確稱量25.0g呢？當然準確稱取25.0g，是實驗室追求的，然而，考慮到實驗室工作效率和微生物學(xué)檢驗的特殊性，要求每份樣品必須稱取25.0g可能并不是特別合理。那么實驗室究竟應(yīng)該如何操作，稱取多少樣品量呢？據(jù)小編了解，目前國內(nèi)大多數(shù)實驗室是采用“四舍五入”的原則，即稱取樣品量為24.5g-25.4g，這也是很多專家老師們推薦的操作方式。而ISO 7218:2007中的5.3.1條款要求：除非另有說明，稱量樣品時，最大允許誤差應(yīng)當?shù)陀?span style="margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; font-family: Calibri; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important;">1%。如果按照這個要求，我們稱取樣品的量應(yīng)該為24.75g-25.25g，然而我們的天平的感量是0.1g，所以我們稱取的樣品量就應(yīng)該是24.8-25.2之間。由于現(xiàn)在我們的標準中沒有準確要求，以上兩個稱量范圍的要求都可以供實驗室參考，因此，建議實驗室制定自己的作業(yè)指導(dǎo)書，并在其中規(guī)定具體采用哪個稱量范圍。

本次討論了食品微生物檢驗樣品前處理常見的四個問題。以上觀點僅代表小編的個人觀點，供大家參考，如果有疑問，歡迎大家留言探討。