在色譜儀分析檢測(cè)過(guò)程中，分配系數(shù)和容量因子一定程度上展現(xiàn)色譜柱的柱效，了解影響色譜柱分離度的因素，有助于有效地使用和保養(yǎng)色譜柱，提高色譜柱分離度和色譜儀檢測(cè)靈敏度。
分配系數(shù)是指在一定溫度下，待測(cè)樣品在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，在固定相與流動(dòng)相中的濃度之比。分配系數(shù)與組分、流動(dòng)相和固定相的溫度、壓力有關(guān)。在液相色譜儀中，固定相確定后，分配系數(shù)主要受流動(dòng)相的性質(zhì)影響。在試驗(yàn)中主要靠調(diào)整流動(dòng)相的組成配比及pH值，以獲得組分間的分配系數(shù)差異及適宜的保留時(shí)間，達(dá)到分離的目的。
在流動(dòng)相、固定相、溫度和壓力一定條件下，樣品濃度很低時(shí)，分配系數(shù)只取決于組分的性質(zhì)，而與濃度無(wú)關(guān)。在大多情況下，分配系數(shù)隨著濃度的增大而減小，這時(shí)色譜峰為拖尾峰；而有時(shí)隨著溶質(zhì)濃度增大，分配系數(shù)也增大，這時(shí)色譜峰為前延峰。因此，只有盡可能減少進(jìn)樣量，使組分在柱內(nèi)濃度降低，分配系數(shù)恒定時(shí)，才能獲得正常峰。在同一色譜條件下，樣品中分配系數(shù)值大的組分在固定相中滯留時(shí)間長(zhǎng)，后流出色譜柱；分配系數(shù)值小的組分則滯留時(shí)間短，先流出色譜柱。混合物中各組分的分配系數(shù)相差越大，越容易分離，因此混合物中各組分的分配系數(shù)不同是色譜分離的前提。分配系數(shù)K和分配比k的關(guān)系：K=k·ββ為相比率，是反映各種色譜柱柱形特點(diǎn)的又一個(gè)參數(shù)，β=Vm/Vs，Vm為流動(dòng)相的體積，即死時(shí)間(t0)與流動(dòng)相流速的乘積，Vs為色譜柱中固定相的體積。對(duì)填充柱其β值一般為6~35，對(duì)毛細(xì)管其β值為60~600。容量因子是待測(cè)樣品在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，在固定相與流動(dòng)相中的量之比。因此容量因子也稱(chēng)質(zhì)量分配系數(shù)。容量因子的物理意義：表示一個(gè)組分在固定相中停留的時(shí)間是不保留組分保留時(shí)間的倍數(shù)。分配系數(shù)為0時(shí)，化合物全部存在于流動(dòng)相中，在固定相中不保留，停留的時(shí)間為0；分配系數(shù)越大，說(shuō)明固定相對(duì)此組分的容量越大，出柱慢，保留時(shí)間越長(zhǎng)。分配系數(shù)K，容量因子k與保留時(shí)間之間有如下關(guān)系：k=t'R/t0，t'R=tR-t0上式說(shuō)明容量因子的物理意義:表示一個(gè)組分在固定相中停留的時(shí)間(t'R)是不保留組分保留時(shí)間(t0)的幾倍。k=0時(shí)，化合物全部存在于流動(dòng)相中，在固定相中不保留，t'R=0；k越大，說(shuō)明固定相對(duì)此組分的容量越大，出柱慢，保留時(shí)間越長(zhǎng)。容量因子與分配系數(shù)的不同點(diǎn)是：k取決于組分、流動(dòng)相、固定相的性質(zhì)及溫度，而與體積Vs、Vm無(wú)關(guān);K除了與性質(zhì)及溫度有關(guān)外，還與Vs、Vm有關(guān)。由于t'R、t0較Vs、Vm易于測(cè)定，所以容量因子比分配系數(shù)應(yīng)用更廣泛。
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發(fā)布日期：2022-02-10
