改良山梨醇麥康凱瓊脂（TC-SMAC）：山梨醇麥康凱瓊脂加入過濾除菌的1%亞碲酸鉀溶液，使終濃度2.5mg/L，頭孢克污，使終濃度為0.05mg/L。
MUG-LST肉湯：LST肉湯中添加4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG），使終濃度為0.1g/L。

2、增菌培養(yǎng)

　　秤取25克樣品放入225mL mEC中，均質(zhì)。于41±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。

3、分離

　　將mEC肉湯培養(yǎng)物10倍遞增稀釋。從10-4，10-5，10-6稀釋度，各取0.1mL涂布于TC-SMAC平板。于36±1℃培養(yǎng)18~24小時(shí)。

　　可疑 EHEC O157:H7菌落扁平，透明或半透明，邊緣光滑，呈淡褐色中心，直徑約2mm。

4、鑒定

　　挑取TC-SMAC上的可疑菌落，接種MUG-LST，于36±1℃培養(yǎng)18~24小時(shí)，出現(xiàn)產(chǎn)氣，且無熒光者，分離到普通營養(yǎng)瓊脂。

　　對純菌落用EHEC O157:H7標(biāo)準(zhǔn)血清或膠乳凝集試劑作凝集試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行生化試驗(yàn)。

　　在檢測過程中，也可以在選擇性增菌后，取出5mL增菌液，經(jīng)100℃水浴15分鐘滅活后，供自動酶聯(lián)熒光免疫測試（VIDAS），迅速獲得初步結(jié)果，陽性反應(yīng)者需作進(jìn)一步證實(shí)。

檢樣25g

↓

　　　　　　mEC225mL → VIDAS快速篩選

　　↓41±1℃，18-24h

10^-4，10^-5，10^-6稀釋度涂布TC-SMAC

↓36±1℃，18-24h

挑取5-10個可疑菌落接種MUG-LST

↓36±1℃，18-24h

MUG陰性培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種普通營養(yǎng)瓊脂

↓ 　　　　↓

生化反應(yīng)鑒定 　　　血清凝集鑒定

　　　　　　　或

　　　　　　　　　膠乳凝集試驗(yàn)

　　用上述方法在樣品中分離獲得的純菌落，經(jīng)抗E.coli O157:H7標(biāo)準(zhǔn)血清或EHEC O157:H7膠乳凝集測試為陽性者，報(bào)告檢出腸出血性大腸桿菌O157:H7。

　　如需要進(jìn)一步檢測Vero毒素基因的存在，可通過接種Vero細(xì)胞或Hela細(xì)胞，觀察細(xì)胞病變進(jìn)行判定，或可使用基因探針檢測和聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測法。（參見FDA細(xì)菌分析手冊第8版）