1 掌握冷凍切片的方法
2 掌握冷凍切片的用途

實(shí)驗(yàn)原理 
冷凍切片是借助低溫使組織凍結(jié)達(dá)到一定的硬度并通過(guò)冰起支撐作用來(lái)進(jìn)行切片的一種方法。
速凍 可減小冰晶直徑，避免組織細(xì)胞損傷。
制冷 壓縮機(jī)佛里昂制冷、半導(dǎo)體溫差電制冷

實(shí)驗(yàn)材料 
新鮮動(dòng)物肝臟

實(shí)驗(yàn)方法 
1 準(zhǔn)備 將儀器 打開(kāi)，樣品臺(tái)溫度調(diào)至-40 ℃。
2 取材 組織必須新鮮，盡可能不經(jīng)水洗。取材時(shí)應(yīng)避免組織擠壓，防止人為假象 。樣品大小5X5X3mm。
3 速凍 將樣品放在樣品臺(tái)上，樣品四周加水加固，冷凍5－10min.
4 切片 升高溫度至-15℃（視樣品而定），約5min后開(kāi)始切片，厚度6-15um。
5 制片 將切片直接放在載波片上或先放在盛水（固定液）的培養(yǎng)皿中再轉(zhuǎn)移到載波片上。
6 染色觀察 吸干水，加一滴蘇木精，加蓋玻片，用顯微鏡觀察。
7 記錄 將觀察的結(jié)果繪于實(shí)驗(yàn)報(bào)告上，整理自己用過(guò)的物品。

附：切片溫度的設(shè)定 
腦 -12℃
肝臟 -14℃
腎臟 -16℃
肌肉 -20℃
皮膚 -25℃
多脂肪組織 -30℃
經(jīng)過(guò)固定的組織 -5℃ ～-10℃

附：快速永久制 片
1 固定 70％乙醇5～10min；
2 水洗 2min；
3 蘇木精染色 5～10min；
4 脫色 0.1%HCl 至變紅；
5 藍(lán)化0.1NaOH 變藍(lán)；
6 水洗 5～10s ；
7 脫水 70% 2min ；
8 伊紅染色 5～10min ；
9 脫水 100%乙醇2minX2；
10 透明 二甲苯 3min；
11 封片 中性樹(shù)膠封片。

冷凍切片機(jī)的基本操作：
1.在使用前2小時(shí)開(kāi)啟電源，并將溫度設(shè)定在-25℃;
2.將適當(dāng)大小和厚度的標(biāo)本放在蘑菇狀杯上，加上冷凍蠟，夾在切片機(jī)的固定槽內(nèi);
3.準(zhǔn)備好玻片，選擇切片厚度，搖動(dòng)手柄，即可做成切片;
4.將做成的切片小心的吸附在玻璃片上;
5.使用結(jié)束后關(guān)閉電源,清潔腔體和擦干水氣, 做好使用記錄。
6.為讓水蒸氣蒸發(fā)，請(qǐng)不要馬上關(guān)閉切片機(jī)的上蓋移門(mén)，應(yīng)到第二天再關(guān)。如需詳細(xì)說(shuō)明，請(qǐng)借閱說(shuō)明書(shū)。