通過制片與觀察加深理解細(xì)胞的運(yùn)動、吞噬等生理活動。 

【實驗用品】 

一、材料和標(biāo)本 雄性蟾蜍、小白鼠、l％雞血懸液、6％淀粉肉湯、草履蟲。 

二、器材和儀器 光鏡、2ml注射器、載玻片、蓋玻片、解剖器材、滴管、移液管、試管、玻璃片、黑紙。 

三、試劑 0.3％臺盼蘭、1％剛果紅。 

【實驗內(nèi)容】 

一、細(xì)胞的吞噬活動 

（一）原理 

白細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)中能游走的單位。它分為粒細(xì)胞系、單核細(xì)胞系、淋巴系三類。它們有許多生理功能，如游走性、變形運(yùn)動、趨化性、吞噬異物等。在白細(xì)胞中，以粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的吞噬活動較強(qiáng)，故稱此二類細(xì)胞為吞噬細(xì)胞。單核細(xì)胞由血液進(jìn)入組織后逐漸演變成巨噬細(xì)胞。吞噬細(xì)胞主要靠吞噬來處理異物。吞噬細(xì)胞首先由于趨化作用而向異物游走，然后伸出偽足包圍異物，并發(fā)生內(nèi)吞作用形成吞噬泡將異物吞入細(xì)胞，繼而溶酶體與吞噬泡融合消化異物。 

（二）小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活動的觀察 

l．實驗前二天，每天向小鼠腹腔注射6％淀粉肉湯O．5～1ml（含O．3％臺盼蘭，起標(biāo)記作用），以刺激腹腔產(chǎn)生較多的巨噬細(xì)胞（此步由教師在實驗前進(jìn)行完畢）。 

2．實驗時，每組取一只經(jīng)上述處理的小鼠，腹腔注射1％雞血懸液0．5～1ml，注射后輕揉小鼠腹部以使紅細(xì)胞懸液分散均勻。 

3．1小時后，用頸椎脫位法處死小鼠，迅速剖開小鼠腹壁，向腹腔注入O．5ml～1ml生理鹽水，用牙簽輕輕攪拌使生理鹽水與腹腔液混勻。 

4．用注射器抽取腹腔液，滴片，然后蓋上蓋片。 

5．鏡檢，高倍鏡下畫圖記錄所見結(jié)果。 

二、暗視野觀察細(xì)胞的纖毛和鞭毛運(yùn)動 

（一）原理 

暗視野照明法是一種不使照射被檢物體的光線直接進(jìn)入物鏡的照明方法。常常用它來觀察沒有染色的活體細(xì)胞或膠體粒子。利用此照明法，在鏡檢時不能直接看到通過標(biāo)本的照明光線，只有被檢物體反射或衍射的光線進(jìn)入物鏡可以提高分辨率，在暗視野中可以看到明亮的被檢物體的存在和運(yùn)動，但它們的內(nèi)部結(jié)構(gòu)卻看不清楚。 

（二）自制遮光板變普通顯微鏡為“簡單的暗視野顯微鏡”。 

步驟： 

1．將顯微鏡聚光器調(diào)到最高位，用低倍鏡調(diào)焦至清楚。 

2．取下目鏡，從鏡筒中觀察并調(diào)節(jié)光圈的大小，使其與鏡筒中所見物鏡的視野相等。 

3．放一塊透明玻璃于載物臺透光孔上，用尺子測量光圈孔徑。 

4．按照圖6--1的形狀，用黑紙剪成與調(diào)節(jié)后光圈孔徑一樣大小的中央遮光板。 

5．將中央遮光板放置在顯微鏡的濾光框上，即可進(jìn)行標(biāo)本的暗視野觀察。 

注：如果使用高倍鏡觀察標(biāo)本時，應(yīng)按高倍鏡調(diào)焦的視野大小重新制作中央遮光板。