1.1菌株的采集

實(shí)驗(yàn)室用菌種一是到國(guó)家法定機(jī)構(gòu)采購(gòu)，二是購(gòu)買商業(yè)派生菌種，三是科研中菌種交流。不管是哪種來(lái)源，均統(tǒng)一采集。采集中嚴(yán)格按照規(guī)范執(zhí)行。要求包裝可靠，采集迅速，不泄漏不污染。保證菌種合格和環(huán)境安全。采集中要有菌種傳代標(biāo)識(shí)。選擇有資質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株的合格供應(yīng)商，每批標(biāo)準(zhǔn)菌株必須附帶有供應(yīng)商的合格證或檢測(cè)報(bào)告或說(shuō)明書，來(lái)證明所采購(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)菌株是合格的。

1.2標(biāo)準(zhǔn)菌株和驗(yàn)收

實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)準(zhǔn)菌株，首先應(yīng)進(jìn)行符合性感官檢查，記錄菌株號(hào)和標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源途徑信息，確保溯源性清楚。同時(shí)還應(yīng)記錄標(biāo)準(zhǔn)菌株名稱和數(shù)量、生產(chǎn)日期、接收日期和有無(wú)破損等情況。

1.3凍干標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)活

1.3.1開啟產(chǎn)品包裝：先用70%酒精棉擦拭外包裝，再打開使用。

1.3.2復(fù)活：選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件（根據(jù)菌種使用說(shuō)明書，見附錄）進(jìn)行復(fù)活。菌種的首次活化最好是在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上，除非特殊情況或特別推薦，一般不用液體培養(yǎng)基。凍干菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代，從標(biāo)準(zhǔn)菌株保藏中心購(gòu)買的凍干標(biāo)準(zhǔn)菌株為第0代。

1.4工作菌株確認(rèn)方法及依據(jù)

用無(wú)菌接種環(huán)取上述培養(yǎng)物，在相應(yīng)的培養(yǎng)基平板（營(yíng)養(yǎng)瓊脂、大豆胰蛋白胨瓊脂）上或相應(yīng)的細(xì)菌鑒別平板（如伊紅美藍(lán)、麥康凱、BP等上劃線分離單個(gè)菌落，置適宜條件下培養(yǎng)（若該類微生物為厭氧菌，則培養(yǎng)條件應(yīng)為厭氧條件）。以同樣方法取真菌和酵母菌至SDA（薩布羅培養(yǎng)基）平板上或玫瑰紅鈉培養(yǎng)基平板上，23～28℃下培養(yǎng)7d；培養(yǎng)后觀察是否具有典型的菌落狀態(tài)，然后挑取單一純菌落，進(jìn)行革蘭染色、鏡檢，觀察其染色特征及菌體形態(tài)以確定菌種。

1.5 污染處理

假如在該平板上發(fā)現(xiàn)有其他菌落生長(zhǎng)，則說(shuō)明操作有污染或菌種不純。要將該污染培養(yǎng)物做滅菌處理，尋找原因，重新分離挑選純菌落。