做好日常的儀器維護保養(yǎng)，養(yǎng)成習(xí)慣，能極大的降低故障率，減少維修和停機成本。從儀器的硬件結(jié)構(gòu)來講，按照流動相經(jīng)過的順序有以下組成部分：流動相溶劑瓶→在線脫氣機→高壓泵→自動/手動進樣器→色譜柱柱溫箱→檢測器→廢液。

下面我們就依照這個順序來講儀器的各個部分在日常使用中需要注意的事項。

一、首先是溶劑瓶，大家好像覺得溶劑瓶無非就是幾個玻璃瓶子，好像根本沒什么可說的。但是，這個看著簡單，如果不注意，經(jīng)常會惹出不少麻煩：

1.1 第一個就是污染：要特別小心盛了水或者緩沖液的瓶子，雖然液相用的水大都經(jīng)過殺菌處理，不過，細菌的生命很頑強，在適當(dāng)?shù)臏囟群凸庹盏那闆r下，他們就會活躍起來，如果流動相里又加入了磷酸鹽一類的添加劑，它們更是如虎添翼。所以，溶劑瓶要做的非常重要的工作就是勤換流動相，常換常新。另外關(guān)于防止細菌滋生的另外一個辦法是在水中加入一定濃度的疊氮化鈉，不過，這個東西又劇毒，又管制，不是很好弄到，而且風(fēng)險也很高，所以，在我看來，還是直接換新的流動相更方便。

1.2 水相要常換，那么有機相呢?總不用擔(dān)心細菌繁殖了吧?沒錯，有機相完全不用擔(dān)心，不過如果是裝乙腈的瓶子，要特別小心乙腈的“聚合”，在自然條件下尤其是適宜的光照條件下，乙腈分子就會和身邊的小伙伴手拉手搞起小團體，小團體還會慢慢壯大，直到大到能被眼睛看見了，瓶子里就會出現(xiàn)一些絮狀的沉淀物，這就是乙腈的“聚合”。為了防止聚合的出現(xiàn)，要特別注意裝乙腈最好用個茶色的溶劑瓶，避免陽光直射，還有就是換乙腈的時候一定把瓶底剩下的倒掉了換新的。

1.3 說完溶液，我們還得注意下瓶子自身，通常瓶子的瓶蓋上會有幾個小孔，是供流動相管道通過的，不過不知道為什么要多開幾個?我見到過有些使用者會把這個小孔堵起來，這是防止有機溶劑揮發(fā)減小實驗室污染和防止灰塵進入流動相瓶子的好辦法，不過，如果這些個小孔被徹底堵住，在加上瓶蓋也擰的很緊的情況下，可能會出現(xiàn)流動相吸液不暢的情況，因為瓶子里徹底和大氣壓隔絕了!為了解決這個問題，大家其實可以咨詢廠商去買一種叫做“安全瓶蓋”的東西，可以防止揮發(fā)和灰塵，還不用擔(dān)心徹底堵死空氣。

1.4 最后一個，是溶劑瓶里的過濾頭，它的作用是為了防止溶液瓶中的顆粒雜質(zhì)進入到儀器的流路系統(tǒng)中，過濾的孔徑是0.45um，材質(zhì)分為玻璃燒結(jié)石英和不銹鋼的，如果這個東西臟了的話，也會造成流動相吸液不暢，可以進行清洗，玻璃材質(zhì)的通常是用稀硝酸泡，過夜;不銹鋼材質(zhì)的可以直接超聲清洗。

二、接下來就是脫氣了，脫氣的作用是為了除去流動相中溶解的氣體，所以我們就得從氣體開始說：

2.1 怎么才能讓脫氣機高效的運行，最好的辦法就是“幫它一把”，其實就是預(yù)先對流動相進行一下脫氣了，流動相配好之后，現(xiàn)在超聲波清洗機里脫氣幾分鐘，能大幅度減少脫氣機的工作負擔(dān)，因為脫氣機的脫氣效率是一定的，如果溶液里溶解的氣體超過了脫氣機能處理的最大值(尤其是在高流速的情況下)，氣體就除不干凈了，那時候就可能在混合的時候出現(xiàn)氣泡影響儀器壓力波動和噪音了。

2.2 脫氣機除了怕脫不干凈之外，還怕堵，脫氣機會堵么?通常不會，不過，在經(jīng)過一個長假之后，就不好說了，堵掉脫氣機的罪魁禍?zhǔn)�，還是流動相里的微生物，細菌藻類，如果他們跟著流動相停留在脫氣機里，過上幾天一個禮拜，很可能就發(fā)展成規(guī)模了，那樣脫氣機的管道里可能就布滿了“水藻”然后就堵住了，所以，脫氣機要特別注意的是，在長時間不使用儀器的時候，比如國慶節(jié)假期，一定要把水相管路中的溶液都替換成甲醇，防止“長草”，乙腈也是不推薦的，因為會“聚合”。

2.3 堵和漏是一對歡喜冤家，液相色譜上能堵的地方，也都有可能漏，脫氣機也不例外，通常漏液有兩種可能，一種是接頭松動，只要重新擰緊即可;另外一種情況就比較倒霉了，真空腔損壞，這個就要大修了，造成這種災(zāi)難的通常都是流動相流速超過了脫氣機能耐受的最大流速，通常這種情況是在purge的時候不小心超過了最大流速，或者是為了方便使用了注射器直接通過管路吸了流動相，要小心操作。

三、跟著流動相的足跡，到了高壓泵，泵是液相色譜最核心的部件，通常也是最貴的一個部件，要小心使用：

3.1 很多情況下，泵的問題反映在壓力上，壓力波動又是最常見的一類問題，泵正常的壓力波動通常會在2%以內(nèi)，切平穩(wěn)規(guī)律，不正常的波動通常由于氣泡和鹽造成：如果流動相中的氣泡沒有被脫氣機除掉而到了泵以后，那么就會造成壓力波動，通常我們可以通過重新purge流路和再次脫氣流動相解決;由鹽造成的波動主要是因為流動相中加入了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動相與有機相混合的時候，鹽會有微小的析出，從而導(dǎo)致壓力異常波動，解決這類問題可以考慮適當(dāng)?shù)慕档望}濃度，或者使用甲醇取代乙腈有機相，如果由于種種原因一定要用到這種流動相，可以考慮在有機相中加入一定比例的水，比如10～20然后適當(dāng)提高梯度結(jié)束的終點。

3.2 在泵的維護里還有一個經(jīng)常會做的工作就是更換purge閥上的過濾白頭，其實難點不在更換這個白頭本身上，而是在于判斷什么時候該換，通常判斷的標(biāo)準(zhǔn)是純水5mL/min流速purge的時候，如果壓力超過10bar，要考慮更換。更換下來的白頭，也可以大概判斷儀器的使用狀況：如果白頭是白色的，好像不臟，但就是堵，那有可能是流動相中的鹽有析出造成的，這臺儀器長期忍受著高鹽流動相;如果換下來的是灰黑色的，這是最常見的狀況，這是由于泵頭密封墊的磨損造成的，如果出現(xiàn)頻繁更換白頭切更換下來的都是灰黑色的話，提示儀器密封墊的磨損過快，可能要考慮升級柱塞桿清洗的設(shè)備;如果這個白頭換下來的顏色是黃色，綠色等怪異的顏色，那么，儀器該講講衛(wèi)生了，這是流動相里的微生物造成的。

3.3 在泵的使用過程中，有時會遇到替換流動相的情況，這中替換是指從反相溶劑替換到正相溶劑或者反過來替換的過程，這個過程最重要的就是流動相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不互溶的，所以在替換中間，一定要用異丙醇徹底沖洗系統(tǒng)，保證管路里所有的原有溶劑都被異丙醇替換掉。

四、繼續(xù)走，就到了進樣器，進樣器分手動和自動兩大類，兩者雖然工作模式不同，但是使用的要點是基本一樣的：

4.1 自動進樣器最常見的問題就是臟，用專業(yè)說法叫交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因很直接，樣品殘留在進樣針內(nèi)/外表面，并隨在下一次進樣進入色譜系統(tǒng)，要解決交叉污染，也很簡單，就是洗，自動進樣器都會有洗針的功能，如果樣品濃度較高或者是吸附性比較強的樣品，一定要打開此功能，由于儀器設(shè)計的原理，安捷倫的自動進樣器無需清洗進樣針內(nèi)壁;手動進樣器的話，要注意手動清洗針的內(nèi)外表面。如果忘記打開洗針功能，污染可能已經(jīng)殘留在了針座或流通閥上，這個時候要最這兩個部件清洗，需要按照儀器說明書上的維護步驟拆下這兩個部件進行超聲清洗。

4.2 出現(xiàn)在自動進樣器上的另外一個問題是峰面積重現(xiàn)性問題。通常這是因為自動進樣器吸樣品的時候出現(xiàn)了問題，首先觀察樣品的液面是不是足夠高，以保證進樣器可以吸到;如果排除了這個問題，就要看看自動進樣器的設(shè)置了，對于一些粘度大的樣品，要降低自動進樣器的吸取速度，這個可以在儀器設(shè)置中改變;當(dāng)然，還有一些更罕見的問題：樣品吸附在了樣品瓶上，這個時候可以考慮換一中材質(zhì)的樣品瓶;還有一類情況，是由于樣品瓶的瓶蓋擰的太緊，導(dǎo)致瓶內(nèi)與空氣隔絕，使得吸樣不準(zhǔn)確，這個時候可以考慮適當(dāng)?shù)陌哑可w擰松一點。

五、柱溫箱，柱溫箱里有色譜柱，其實分離是發(fā)生在色譜柱上，柱溫箱本身設(shè)計到的維護和使用要點倒是沒有什么太多可說。

個人認為柱溫箱其實是整個液相色譜系統(tǒng)里最皮實的一個部件，只要保證接頭擰好不漏，好像一萬年也不會見到它出問題，唯一需要注意的是安捷倫的柱溫箱會有兩個控溫區(qū)，左邊的區(qū)域上寫著3uL，右邊寫著6uL，表示這兩個溫區(qū)內(nèi)的體積不一樣，通常，我們要使用3uL的那個，以減小儀器的延遲和擴散。

六、檢測器。檢測器的種類非常多，而且各有特性，在這里我們還是找大家最常用的紫外(VWD)/二極管陣列(DAD)檢測器來說。這兩類都是紫外類的檢測器，雖然光路設(shè)計不同，但是本質(zhì)的原理都是相同的。

6.1 檢測里有個非常重要的部件是光源，俗稱燈，燈是一個消耗品，就像家里的燈泡一樣，用一定程度就壞了。但是檢測器里的燈不能家里的電燈泡一樣點不亮了再換，因為放在檢測器里的燈是對發(fā)射能量有要求的，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)基線噪音變大，靈敏度降低等一系列影響使用的問題。通常，燈的壽命是2000h，當(dāng)?shù)竭_這個時限的時候，我們就要特別關(guān)注燈的能量狀況，可以通過儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”這個測試來判斷，測試的結(jié)果會分別評估低中高三個波長段的能量，一旦某個波長段的結(jié)果顯示失敗，就表示要換燈了，通常首先出現(xiàn)失敗的都是低波長段。

6.2 檢測器里另外的一個重要部件是檢測池，也叫流通池。很多時候，大家最關(guān)心的一個問題是檢測池被堵掉，因為檢測池通常不是很耐壓，所以一旦堵掉，很可能造成損壞。不過還好，檢測池通常不太容易被堵，原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會被色譜柱攔下了，所以堵塞檢測器的東西基本都不是來自樣品的，很可能是后來“產(chǎn)生”的，比如含鹽流動相殘留在了檢測池里導(dǎo)致鹽析出，或者是乙腈聚合在檢測池里，要不就是有些童鞋不太小心，不小心壓住了廢液管線，那就自求多福吧...

6.3 關(guān)于檢測池，有時候還會遇到一個小問題，就是檢測池里的氣泡，氣泡是哪兒來的，可能是流動相中溶解的氣體，也可能是儀器長時間不使用檢測池干了導(dǎo)致的，體現(xiàn)在儀器的表現(xiàn)上，就是基線噪音某明其妙的變大，出現(xiàn)毛刺等等，這個時候，可以先觀察系統(tǒng)壓力，如果壓力平穩(wěn)正常，可以判斷這個波動應(yīng)該不是由于泵造成的，那肯能就是由于檢測池里的氣泡造成的了，對付這個氣泡，沒有太好的辦法，只能用純甲醇慢慢沖，不過倒是有個小辦法可以防止，就是在檢測器的出口出用一小段細內(nèi)徑的PEEK管憋上一點壓力可以很大程度的預(yù)防氣泡的產(chǎn)生，但是注意千萬不要太長，有大概3～5厘米的長度就夠了。