熱力滅菌時(shí)最可靠而普遍應(yīng)用的滅菌法,包括濕熱滅菌和干熱滅菌法。
1.濕熱滅菌法
在同樣的溫度下,溫?zé)岬臍⒕Ч雀蔁岷,其原因有:①蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān),含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分,因較大同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②溫?zé)釡缇^程中蒸氣放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所要溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅菌所需時(shí)間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大,使深部也能達(dá)到滅菌溫度,故濕熱比干熱收效好。
濕熱滅菌法包括有:
(1)煮沸法:煮沸100℃,5分鐘,能殺死一般細(xì)菌的繁殖體。許多芽胞需經(jīng)煮潮5~6小時(shí)才死亡。水中加入2%碳酸鈉,可提高其沸點(diǎn)達(dá)105℃。既可促進(jìn)芽胞的殺滅,又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。
(2)流通蒸汽滅菌法:利用100℃左右的水蒸汽進(jìn)行消毒,一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當(dāng)于我國的蒸籠),加熱15到39分鐘,可殺死細(xì)菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過大、過緊以利于蒸汽穿透。
(3)間歇滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽,以達(dá)到滅菌的目的。一般用流通蒸汽滅菌器,100℃加熱15~30分鐘,可殺死其中的繁殖體;但芽胞尚有殘存。取出后放37℃孵箱過夜,使芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再蒸一次,如此連續(xù)三次以上。本法適用于不耐高溫的營養(yǎng)物(如血清培養(yǎng)基)的滅菌。
(4)巴氏消毒法(Pasteurization):利用熱力殺死液體中的病原菌或一般的雜菌,同時(shí)不致嚴(yán)重?fù)p害其質(zhì)量的消耗方法。由巴斯德創(chuàng)用以消毒酒精類,故名。加溫61.1~62.8℃半小時(shí),或71.7℃15~30秒鐘。常用于消毒牛奶和酒類等。
(5)高壓蒸汽滅菌法:壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行的,是熱力滅菌中使用最普遍、效果最可靠的一種方法。其優(yōu)點(diǎn)是穿透力強(qiáng),滅菌效果可靠,能殺滅所有微生物。
目前使用的壓力滅菌器可分為兩類:下排氣式壓力滅菌器和預(yù)真空壓力滅菌器。適用于耐高溫、耐水物品的滅菌。
2.干熱滅菌法
干熱滅菌比濕熱滅菌需要更高的溫度與較長的時(shí)間。
(1)干烤:利用干烤箱,加熱160~180℃2小時(shí),可殺死一切微生物,包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。
(2)燒灼和焚燒:燒灼是直接用火焰殺死微生物,適用于微生物實(shí)驗(yàn)室的接種針等不怕熱的金屬器材的滅菌。焚燒是徹底的消毒方法,但只限于處理廢棄的污染物品,如無用的衣物、紙張、垃圾等。焚燒應(yīng)在專用的焚燒爐內(nèi)進(jìn)行。
(3) 紅外線:紅外線輻射是一種0.77~1000微米波長的電磁波,有較好的熱效應(yīng),尤以1~10微米波長的熱效應(yīng)最強(qiáng)。亦被認(rèn)為一種干熱滅菌。紅外線由紅外線燈泡產(chǎn)生,不需要經(jīng)空氣傳導(dǎo),所以加熱速度快,但熱效應(yīng)只能在照射到的表面產(chǎn)生,因此不能使一個(gè)物體的前后左右均勻加熱。紅外線的殺菌作用與干熱相似,利用紅外線烤箱滅菌的所需溫度和時(shí)間亦同于干烤。多用于醫(yī)療器械的滅菌。
人受紅外線照射較長會(huì)感覺眼睛疲勞及頭疼;長期照射會(huì)造成眼內(nèi)損傷。因此,工作人至少應(yīng)戴能防紅外線傷害的防護(hù)鏡。
(4)微波:微波是一種波長為1毫米到1米左右的電磁波,頻率較高,可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì),但不能穿透金屬表面。微波能使介質(zhì)內(nèi)雜亂無章的極性分子在微波場(chǎng)的作用下,按波的頻率往返運(yùn)動(dòng),互相沖撞和磨擦而產(chǎn)生熱,介質(zhì)的溫度可隨之升高,因而在較低的溫度下能起到消毒作用。一般認(rèn)為其殺菌機(jī)理除熱效應(yīng)以外,還有電磁共振效應(yīng),場(chǎng)致力效應(yīng)等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ與915MHZ兩種。微波照射多用于食品加工。在醫(yī)院中可用于檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無菌病室的食品食具、藥杯及其它用品的消毒。
微波長期照射可引起眼睛的晶狀混濁、睪丸損傷和神經(jīng)功能紊亂等全身性反應(yīng),因此必須關(guān)好門后才開始操作。
1.濕熱滅菌法
在同樣的溫度下,溫?zé)岬臍⒕Ч雀蔁岷,其原因有:①蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān),含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分,因較大同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②溫?zé)釡缇^程中蒸氣放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所要溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅菌所需時(shí)間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大,使深部也能達(dá)到滅菌溫度,故濕熱比干熱收效好。
濕熱滅菌法包括有:
(1)煮沸法:煮沸100℃,5分鐘,能殺死一般細(xì)菌的繁殖體。許多芽胞需經(jīng)煮潮5~6小時(shí)才死亡。水中加入2%碳酸鈉,可提高其沸點(diǎn)達(dá)105℃。既可促進(jìn)芽胞的殺滅,又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。
(2)流通蒸汽滅菌法:利用100℃左右的水蒸汽進(jìn)行消毒,一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當(dāng)于我國的蒸籠),加熱15到39分鐘,可殺死細(xì)菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過大、過緊以利于蒸汽穿透。
(3)間歇滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽,以達(dá)到滅菌的目的。一般用流通蒸汽滅菌器,100℃加熱15~30分鐘,可殺死其中的繁殖體;但芽胞尚有殘存。取出后放37℃孵箱過夜,使芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再蒸一次,如此連續(xù)三次以上。本法適用于不耐高溫的營養(yǎng)物(如血清培養(yǎng)基)的滅菌。
(4)巴氏消毒法(Pasteurization):利用熱力殺死液體中的病原菌或一般的雜菌,同時(shí)不致嚴(yán)重?fù)p害其質(zhì)量的消耗方法。由巴斯德創(chuàng)用以消毒酒精類,故名。加溫61.1~62.8℃半小時(shí),或71.7℃15~30秒鐘。常用于消毒牛奶和酒類等。
(5)高壓蒸汽滅菌法:壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行的,是熱力滅菌中使用最普遍、效果最可靠的一種方法。其優(yōu)點(diǎn)是穿透力強(qiáng),滅菌效果可靠,能殺滅所有微生物。
目前使用的壓力滅菌器可分為兩類:下排氣式壓力滅菌器和預(yù)真空壓力滅菌器。適用于耐高溫、耐水物品的滅菌。
2.干熱滅菌法
干熱滅菌比濕熱滅菌需要更高的溫度與較長的時(shí)間。
(1)干烤:利用干烤箱,加熱160~180℃2小時(shí),可殺死一切微生物,包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。
(2)燒灼和焚燒:燒灼是直接用火焰殺死微生物,適用于微生物實(shí)驗(yàn)室的接種針等不怕熱的金屬器材的滅菌。焚燒是徹底的消毒方法,但只限于處理廢棄的污染物品,如無用的衣物、紙張、垃圾等。焚燒應(yīng)在專用的焚燒爐內(nèi)進(jìn)行。
(3) 紅外線:紅外線輻射是一種0.77~1000微米波長的電磁波,有較好的熱效應(yīng),尤以1~10微米波長的熱效應(yīng)最強(qiáng)。亦被認(rèn)為一種干熱滅菌。紅外線由紅外線燈泡產(chǎn)生,不需要經(jīng)空氣傳導(dǎo),所以加熱速度快,但熱效應(yīng)只能在照射到的表面產(chǎn)生,因此不能使一個(gè)物體的前后左右均勻加熱。紅外線的殺菌作用與干熱相似,利用紅外線烤箱滅菌的所需溫度和時(shí)間亦同于干烤。多用于醫(yī)療器械的滅菌。
人受紅外線照射較長會(huì)感覺眼睛疲勞及頭疼;長期照射會(huì)造成眼內(nèi)損傷。因此,工作人至少應(yīng)戴能防紅外線傷害的防護(hù)鏡。
(4)微波:微波是一種波長為1毫米到1米左右的電磁波,頻率較高,可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì),但不能穿透金屬表面。微波能使介質(zhì)內(nèi)雜亂無章的極性分子在微波場(chǎng)的作用下,按波的頻率往返運(yùn)動(dòng),互相沖撞和磨擦而產(chǎn)生熱,介質(zhì)的溫度可隨之升高,因而在較低的溫度下能起到消毒作用。一般認(rèn)為其殺菌機(jī)理除熱效應(yīng)以外,還有電磁共振效應(yīng),場(chǎng)致力效應(yīng)等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ與915MHZ兩種。微波照射多用于食品加工。在醫(yī)院中可用于檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無菌病室的食品食具、藥杯及其它用品的消毒。
微波長期照射可引起眼睛的晶狀混濁、睪丸損傷和神經(jīng)功能紊亂等全身性反應(yīng),因此必須關(guān)好門后才開始操作。