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名稱 |
機(jī)制 |
轉(zhuǎn)染效率 |
用途 |
優(yōu)缺點(diǎn) |
影響因素 |
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磷酸鈣轉(zhuǎn)染法 |
內(nèi)吞作用 |
20%細(xì)胞被轉(zhuǎn)染 |
瞬時(shí)表達(dá) |
1、簡(jiǎn)單有效 2、適用于貼壁、非貼壁細(xì)胞 3、常作首選方法 |
1、Ca2 ，DNA濃度 2、PH值，沉淀反應(yīng)時(shí)間 3、氯喹，甘油和丁酸鈉處理 |
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DEAE葡聚糖轉(zhuǎn)染法 |
抑制核酸酶 內(nèi)吞作用 |
在BDC-1，CV-1和COS細(xì)胞中較高 |
瞬時(shí)表達(dá) |
操作簡(jiǎn)單 |
1、需高濃度DNa 2、DEAE葡聚糖濃度 3、溫育時(shí)間 |
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Poly-brene轉(zhuǎn)染法 |
不清楚 |
低分子量DNA轉(zhuǎn)染率高于磷酸鈣法 |
CHO細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化子 |
能得到較多的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化子 |
1、受體細(xì)胞類(lèi)型 2、轉(zhuǎn)染調(diào)控信號(hào) 3、DNA濃度 |
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原生質(zhì)體融合 |
胞膜融合 |
50-100%轉(zhuǎn)染，穩(wěn)定子得率為0.2-0.02% |
瞬時(shí)表達(dá) 穩(wěn)定表達(dá) |
1、操作復(fù)雜 2、不能進(jìn)行共轉(zhuǎn)染 3、慎用于篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型變異株 |
1、溶菌酶、PEG濃度 2、溫育時(shí)間 |
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電穿孔 |
高壓在膜上形成微孔 |
效率較高 |
瞬時(shí)表達(dá) 穩(wěn)定轉(zhuǎn)化 |
1、需精密儀器 2、可用于動(dòng)物、植物細(xì)胞和細(xì)菌 |
1、電場(chǎng)強(qiáng)度 2、脈沖長(zhǎng)度 3、溫度，DNA濃度 4、培養(yǎng)液 |
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脂質(zhì)體 |
脂膜融合 |
50-60%轉(zhuǎn)染 |
瞬時(shí)表達(dá) 穩(wěn)定轉(zhuǎn)化 |
1、操作簡(jiǎn)單 2、可用于體內(nèi)試驗(yàn) |
1、脂質(zhì)體質(zhì)量 2、DNA濃度 |
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胞核微注射法 |
直接注射 |
50-100%轉(zhuǎn)染 |
穩(wěn)定轉(zhuǎn)化 |
1、需要特殊儀器 2、處理樣品數(shù)量少 3、高效 |
1、注射技術(shù) 2、DNA濃度 |