VIP標識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設(shè)為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng),關(guān)注食品安全,探討食品技術(shù)
 

染色體CBG標本制備

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08  瀏覽次數(shù):309
一、原理
異染色質(zhì)在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現(xiàn)“團塊”,這些染色質(zhì)主要由C顯帶技術(shù)呈現(xiàn),故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區(qū)有很強抗性,仍保留大部分DNA,Giemsa染色后可見效果良好的C帶。抽取DNA的過程由三個連續(xù)操作形成。首先,酸處理可使DNA脫嘌呤,但未使DNA骨架斷裂;其次熱堿處理可使DNA變性,促進繼發(fā)的DNA溶解;最后,熱鹽溶液使DNA骨架斷開并使碎片溶解進入溶液中。因此,最終以Giemsa染料顯示出DNA的不同分布。在優(yōu)良的C帶標本中,常染色質(zhì)只呈現(xiàn)中期染色體的一般外貌,結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)區(qū)著色很深。
C帶在檢查1、9、16特別是Y染色體的異質(zhì)區(qū)時尤為重要。
二、用品和試劑
0.2N HCl,5% Ba(OH)2,2×SSC,Giemsa染色液。恒溫水浴箱,染色缸。其余同外周血染色體制備。
三、操作步驟
(一)方法一
l.酸處理:常規(guī)制作的染色體標本(未染色)置0.2N HCl(室溫)處理15—30分鐘。水洗。
2.堿處理:浸入已預(yù)溫至56℃的5% Ba(OH)2水溶液10分鐘。水洗。
3.熱鹽處理:置2×SSC溶液(67℃)處理60—90分鐘。水洗。
4.染色:l∶10 Giemsa染色液染色10—5分鐘。水洗。氣干。
5.鏡檢。
(二)方法二
l.酸處理:常規(guī)制作的染色體標本(未染色)置0.2N HCl(室溫)處理60分鐘。水洗。
2.堿處理:浸入1% Ba(OH)2水溶液(50℃)中15—20秒。水洗。
3.熱鹽處理:置2×SSC溶液(60℃)90分鐘。水洗三次。
4.染色:l∶10 Giemsa染色液染色10分鐘。水洗。氣干。
5.鏡檢。
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關(guān)閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.012 second(s), 18 queries, Memory 0.88 M