（一）溫度： 對(duì)大多數(shù)植物組織20～28℃即可滿足生長(zhǎng)所需，其中26～27℃最適合。
（二）光： 組織培養(yǎng)通常在散射光線下進(jìn)行。光的影響可導(dǎo)致不同的結(jié)果。有些植物組織在暗處生長(zhǎng)較好，而另一些植物組織在光亮處生長(zhǎng)較好，但由愈傷組織分化成器官時(shí)，則每日必須要有一定時(shí)間的光照才能形成芽和根。有些次生物質(zhì)的形成，光是決定三因素。
（三）滲透壓： 滲透壓對(duì)植物組織的生長(zhǎng)和分化很有關(guān)系。在培養(yǎng)基中添加食鹽、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物質(zhì)可以調(diào)整滲透壓。通常1～2個(gè)大氣壓可促進(jìn)植物組織生長(zhǎng)，2個(gè)大氣壓以上時(shí)，出現(xiàn)生長(zhǎng)障礙，6個(gè)大氣壓時(shí)植物組織即無(wú)法生存。
（四）酸堿度： 一般植物組織生長(zhǎng)的最適宜pH為5～6．5。在培養(yǎng)過(guò)程中pH可發(fā)生變化，加進(jìn)磷酸氫鹽或二氫鹽，可起穩(wěn)定作用。
（五）通氣： 懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞的旺盛生長(zhǎng)必須有良好的通氣條件。小量懸浮培養(yǎng)時(shí)巨常轉(zhuǎn)動(dòng)或振蕩，可起通氣和攪拌作用。大量培養(yǎng)中可采用專(zhuān)門(mén)的通氣和攪拌裝置。