病毒或毒素與相應(yīng)的抗體結(jié)合后，失去對(duì)易感動(dòng)物的致病力，謂之中和試驗(yàn)。本試驗(yàn)主要用于：①從待檢血清中檢出抗體，或從病料中檢出病毒，從而診斷病毒性傳染�。�②用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑒定細(xì)菌的毒素類型；③測(cè)定抗病毒血清或抗毒素效價(jià)；④新分離病毒的鑒定和分型，中和試驗(yàn)不僅可在易感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行，亦可在細(xì)胞培養(yǎng)上或雞胚上進(jìn)行。試驗(yàn)方法主要有簡(jiǎn)單定性試驗(yàn)、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。
本法多將病毒作10倍遞增稀釋，分置2列試管，第一列加正常血清（對(duì)照組），第二列加待檢血清（試驗(yàn)組）。混合后，置
表 固定血清稀釋病毒法術(shù)式
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混合前 病毒稀釋 |
2×10-1 |
2×10-2 |
2×10-3 |
2×10-4 |
2×10-5 |
2×10-6 |
2×10-7 |
- |
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正常 血清 |
稀釋病毒 |
- |
- |
- |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
- |
|
正常血清 |
- |
- |
- |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
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對(duì)照組 |
稀釋液 |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
1.0 |
|
待檢血清 |
稀釋病毒 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
- |
|
待檢血清 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
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中和組 |
稀釋液 |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
1.0 |
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混合后病 毒稀釋 |
10-1 |
10-2 |
10-3 |
10-4 |
10-5 |
10-6 |
10-7 |
- |
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表 固定血清稀釋病毒法中和試驗(yàn)（例）
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病毒稀釋 |
10-1 |
10-2 |
10-3 |
10-4 |
10-5 |
10-6 |
10-7 |
LD50［2］ |
中和指數(shù) |
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正常血清對(duì)照組 |
- |
- |
- |
4／4［1］ |
3／4 |
1／4 |
0／4 |
10-5.5 |
103.3＝1.995 |
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待檢血清中和組 |
4／4 |
2／4 |
1／4 |
0／4 |
0／4 |
0／4 |
0／4 |
10-2.2 |
注：［1］分母為接種數(shù)，分子為死亡數(shù)；
［2］LD50計(jì)算見實(shí)例。
中和指數(shù)＝中和組LD50/對(duì)照組LD50=10-2.2/10-5.5=103.3
查3.3反對(duì)數(shù)是1.995，故中和指數(shù)103.3＝1.995。也就是說該待檢血清中和病毒的能力為正常血清的1.995倍。本法多用以檢出待檢血清中的中和抗體，對(duì)病毒而言，通常中和指數(shù)大于50者判為陽性，10～49為可疑，小于10為陰性。