1、常規(guī)脫蠟浸入0.01mol/LPBS；
2、用0.2mol/L鹽酸處理5min；
3、蛋白酶K(25μg/m1)消化37℃ 15min；
4、分別用80％，95％和100％酒精脫水，室溫干片；
5、加PCR混合液25μL(10mmol/L Tris-HCl，50mmol/L KCl，1.5mmol/L MgCl2，各加200μmol/L dATP，dCTP，dGTP，1.5mmol/L dig-11-dUTP l.5μl，引物250ng，Taq DNA聚合酶2U)，加蓋片；
6、94℃變性5min后置入65℃濕盒中5min；
7、用0.1×SSC液，65℃洗5min；
8、片于65℃ 10s～20s；用4×SSC-0.1％吐溫20液42℃洗5min，2次；
9、經(jīng)Buffer I液洗后滴加20％羊血清封閉30min；
10、加地高辛抗體復(fù)合物(1:500)室溫下2h；
11、BufferⅢ液洗5min；
12、用BCIP-NBT顯色1h～2h，在鏡下控制，終止顯色；
13、用中性紅或核固紅襯染，酒精脫水，二甲苯透明，樹脂封片。
2、用0.2mol/L鹽酸處理5min；
3、蛋白酶K(25μg/m1)消化37℃ 15min；
4、分別用80％，95％和100％酒精脫水，室溫干片；
5、加PCR混合液25μL(10mmol/L Tris-HCl，50mmol/L KCl，1.5mmol/L MgCl2，各加200μmol/L dATP，dCTP，dGTP，1.5mmol/L dig-11-dUTP l.5μl，引物250ng，Taq DNA聚合酶2U)，加蓋片；
6、94℃變性5min后置入65℃濕盒中5min；
7、用0.1×SSC液，65℃洗5min；
8、片于65℃ 10s～20s；用4×SSC-0.1％吐溫20液42℃洗5min，2次；
9、經(jīng)Buffer I液洗后滴加20％羊血清封閉30min；
10、加地高辛抗體復(fù)合物(1:500)室溫下2h；
11、BufferⅢ液洗5min；
12、用BCIP-NBT顯色1h～2h，在鏡下控制，終止顯色；
13、用中性紅或核固紅襯染，酒精脫水，二甲苯透明，樹脂封片。
