分子雜交(簡稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項(xiàng)最基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補(bǔ)關(guān)系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。雜交的局示褪竊諞歡ㄌ跫?率夠ゲ購慫崍?jiān)~迪指蔥?加熱或堿處理)使雙螺旋解開成為單鏈,因此,變性技術(shù)也是核酸雜交的一個(gè)環(huán)節(jié)。
若雜交的目的是識(shí)別靶DNA中的特異核苷酸序列,這需要牽涉到另一項(xiàng)核酸操作的基本技術(shù)─探針(probe)的制備。探針是指帶有某些標(biāo)記物(如放射性同位素32P,熒光物質(zhì)異硫氰酸熒光素等)的特異性核酸序列片段。若我們設(shè)法使一個(gè)核酸序列帶上32P,那么它與靶序列互補(bǔ)形成的雜交雙鏈,就會(huì)帶有放射性。以適當(dāng)方法接受來自雜交鏈的放射信號(hào),即可對(duì)靶序列DNA的存在及其分子大小加以鑒別。在現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,探針的制備和使用是與分子雜交相輔相成的技術(shù)手段。核酸分子雜交作為一項(xiàng)基本技術(shù),已應(yīng)用于核酸結(jié)構(gòu)與功能研究的各個(gè)方面。在醫(yī)學(xué)上,目前已用于多種遺傳性疾病的基因診斷(gene diagnosis),惡性腫瘤的基因分析,傳染病病原體的檢測等領(lǐng)域中,其成果大大促進(jìn)了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和發(fā)展
