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“電子”雜交

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06  瀏覽次數(shù):541
“電子”雜交(electronic hybridization)基本原理同染色體步移是相似的,所不同的只是用EST數(shù)據(jù)庫(kù)代替文庫(kù),且主要用于全長(zhǎng)cDNA克隆。前面已提到EST是長(zhǎng)達(dá)200bp~300bp的cDNA片段,世界各國(guó)的實(shí)驗(yàn)室將分離得到的:EST輸入一個(gè)公開的公共數(shù)據(jù)庫(kù)中。如果有了某個(gè)cDNA的一個(gè)EST后,可輸入vEST數(shù)據(jù)庫(kù)中去搜索同這個(gè)EST有一段共序列的另一個(gè)EST,然后把這兩個(gè)EST裝配成長(zhǎng)的EST,經(jīng)過多次拼接延伸,最后有可能得到一個(gè)全長(zhǎng)cDNA序列。此時(shí)可根據(jù)這個(gè)cDNA序列設(shè)計(jì)引物,在合適的cDNA文庫(kù)中作PCR,擴(kuò)增出真正的全長(zhǎng)cDNA分子。當(dāng)然,在數(shù)據(jù)庫(kù)中搜索和拼接EST等是借助電腦和有關(guān)的軟件進(jìn)行操作,所以稱之為“電子”雜交。
 
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