供免疫用的動(dòng)物主要是哺乳動(dòng)物和禽類，常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動(dòng)物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定，也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體，多采用大動(dòng)物；如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體，則直接采用本動(dòng)物；如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體，則必須用異源動(dòng)物制備抗體；如果難以獲得的抗原，且抗體的需要量少，則可以采用純系小鼠制備；一般實(shí)驗(yàn)室采用的抗體，多用兔和羊制備。
免疫用的動(dòng)物最好選擇適齡的健康雄性動(dòng)物，雌性動(dòng)物特別是妊娠動(dòng)物用于制備免疫抗體則非常不合適，有時(shí)甚至不產(chǎn)生抗體。由于對(duì)免疫應(yīng)答的個(gè)別差異，免疫時(shí)應(yīng)同時(shí)選用數(shù)只動(dòng)物進(jìn)行免疫。
抗原是多種多樣的，而且千差萬別。就其化學(xué)成分而言，有蛋白質(zhì)抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言，有完全抗原和不完全抗原。為了獲得較好的抗血清，最好是選用蛋白質(zhì)抗原，如要制備用于篩選細(xì)菌表達(dá)的cDNA文庫或免疫印跡的抗血清，最好選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原，其免疫原性的強(qiáng)弱均不相同，這種免疫原性的強(qiáng)弱取決于抗原的分子量、化學(xué)活性基團(tuán)、立體結(jié)構(gòu)、物理形狀和彌散速度等。
抗原的免疫劑量是依照給予動(dòng)物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低，不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激，免疫劑量過多，有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi)，抗體的效價(jià)是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言，小鼠的首次免疫劑量為50μg～400μg/次，大鼠為100μg～1 000μg／次，兔為200μg～1 000μg/次。加強(qiáng)計(jì)量為首次劑量的1／5～2／5。
免疫劑量與注射途徑有關(guān)，一般而言，靜脈注射劑量大于皮下注射，而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大，也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小，對(duì)家兔而言，采用弗氏完全佐劑，則需注射0.5mg～1mg/kg./次，如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應(yīng)大10倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價(jià)的抗血清，宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者，可少量多次。免疫周期短者，應(yīng)大量少次。
兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)長短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果，太長則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時(shí)間應(yīng)為5~7天，加佐劑者應(yīng)為2周左右。
注射的Ig純度高，則一般不易引起過敏反應(yīng)，如注射血清，即使是少量，在再次免疫時(shí)，極易引起過敏反應(yīng)，所以一定要采取措施。