本標(biāo)準(zhǔn)參照采用1983年聯(lián)合國糧農(nóng)組織的世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO)食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)發(fā)布的有關(guān)鉛的測定方法。
1 原理
樣品經(jīng)處理加入檸檬銨、氰化鉀和鹽酸羥胺等，消除鐵、銅、鋅等離子干擾，在pH8.5～9.0時(shí)，鉛離子與雙硫腙生成紅色絡(luò)合物，用三氯甲烷提取，與標(biāo)準(zhǔn)系列，比較做限量試驗(yàn)或定量試驗(yàn)。
2 試劑
除特別注明外，本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為去離子水或無鉛水。
2.1 硝酸(GB 626-78)。
2.2 硫酸(GB 625-77)。
2.3 氨水(GB 631-77)(1+1)：如含鉛，須用全玻璃蒸餾器重蒸餾。
2.4 鹽酸(GB 622-77)。
2.5 三氯甲烷(GB 682-78)：不應(yīng)含氧化物。
2.6 酚紅指示液：0.1%乙醇溶液。
2.7 檸檬酸氫二銨(HGB 3294-60):50%溶液。
稱取100g檸檬酸氫二銨，溶于100ml水中，加2滴酚紅指示液，加氨水(1+1)調(diào)節(jié)pH8.5～9.0（由黃變紅，再多加2滴），用雙硫腙三氯甲烷溶液提取數(shù)次，每次10～20ml，至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹�，棄去三氯甲烷洗滌二次，每�?ml，棄去三氯甲烷層，加水稀釋至200ml。
2.8 鹽酸羥胺（HG 3-967-76):20%溶液。
稱取20g鹽酸羥胺，加40ml水溶解，加2滴酚紅指示液，加氨水(1+1)調(diào)節(jié)pH至8.5～9.0（由黃變紅，再多加2滴），用雙硫腙三氯甲烷溶液提取數(shù)次，每次10～20ml，至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹�，再用三氯甲烷洗二次，每�?ml，棄去三氯甲烷層加鹽酸(1+1)呈酸性，加水至100ml。
2.9 氰化鉀：10%溶液。
2.10 二苯基硫巴腙（雙硫腙）(HGB 3343-60):0.05%三氯甲烷溶液，保存于冰箱中，必要時(shí)按下述方法純化。稱取0.5g研細(xì)的雙硫腙，溶于50ml三氯甲烷中，如有殘?jiān)�，可用濾紙過濾于250mlŠ分液漏斗中，用氨水(1+99)提取三次，每次100ml，將提取液用棉花過濾至500ml分液漏斗中，用鹽酸(1+1)調(diào)至酸性，將沉淀出的雙硫腙用200,200,100ml三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷為雙硫腙儲(chǔ)備溶液。
2.10.1 雙硫腙使用液：吸取1.0ml雙硫腙儲(chǔ)備溶液，加9ml三氯甲烷，混勻。
用1cm比色杯，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn),于波長510nm處測吸光度(A),用式(1)算出配制100ml雙硫腙使用液(70%透光率)所需雙硫腙儲(chǔ)備溶液的毫升數(shù)(V)。
10(2-lg70) 1.55
V=--------------------- =---------- ………… (1)
A A
2.11 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.1598g高純硝酸鉛(HG 3-1309-80)，加10ml 1%硝酸，溶解后定量移入100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液1ml相當(dāng)于1mg鉛。臨用前水稀釋成1ml相當(dāng)于10μg鉛。
2.12 1%硝酸：取1ml硝酸(GB 626-78),加水稀釋至100ml。
3 儀器
所用玻璃儀器均用10～20%硝酸浸泡24h以上，用自來水反復(fù)沖洗，最后用水沖洗干凈。
3.1 分光光度計(jì)。
3.2 125ml分液漏斗。
3.3 250ml凱氏燒瓶或250ml三角燒瓶。
4 樣品處理
4.1 無機(jī)樣品的“樣品處理”可按各標(biāo)準(zhǔn)文本中規(guī)定的方法進(jìn)行。
4.2 有機(jī)樣品的“樣品處理”除按各標(biāo)準(zhǔn)文本中規(guī)定的外，一般按下述程序進(jìn)行。
4.2.1 濕法消解：稱取5.0g樣品，置于250ml凱氏燒瓶或三角燒瓶中，加入10ml硝酸浸潤樣品，放置片刻（或過夜）后，緩緩加熱，待作用緩和后稍冷，沿瓶壁加入5ml硫酸，再緩緩加熱，至瓶中溶液開始變成棕色，不斷滴加硝酸（如有必要可滴加些高氯酸，在操作過程中，應(yīng)注意防止爆炸），至有機(jī)質(zhì)分解完全，繼續(xù)加熱，至生成大量的二氧化硫白色煙霧，最后溶液應(yīng)呈無色或微帶黃色。冷卻后將溶液移入50ml容量瓶中，用少量水分次洗滌凱氏燒瓶或三角燒瓶，將洗液一并移入容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。每10ml溶液相當(dāng)于1.0g樣品。
取一坩堝，按上述方法做試劑空白試驗(yàn)。
4.2.2 干法消解：村法適用于不適合用濕法消解的樣品。
稱取5.0g樣品于瓷坩堝中，加入適量硫酸濕潤樣品，小心炭化后，加2ml硝酸和5滴硫酸，小心加熱，直到白色煙霧揮盡，移入高溫爐中，于550℃灰化完全。冷后取出。加1ml硝酸(1+1)溶液，加熱使灰分溶解，將樣品液轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中（必要時(shí)過濾），并用少量水洗滌坩堝，洗液一并移入容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。每10ml溶液相當(dāng)于1.0g樣品。
取一坩堝，按上述方法做試劑空白試驗(yàn)。
5 測定
5.1 限量試驗(yàn)
吸取適量樣品液及鉛的限量標(biāo)準(zhǔn)液（含鉛不低于5μg），分別置于125ml分液漏斗中，各加1%硝酸至20ml。
向樣品液及鉛的限量標(biāo)準(zhǔn)液中各加入1ml50%檸檬銨溶液、1ml20%鹽酸羥胺溶液和2滴酚紅指示液，用氨水(1+1)調(diào)至紅色，再各加2ml 10%氰化鉀溶液，混勻后，加入5.0ml雙硫腙使用液，劇烈振搖1min，靜置分層后，三氯甲烷層經(jīng)脫脂棉濾入1cm比色杯中，于波長510nm處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，測定吸光度，或進(jìn)行目視比色，樣品液的吸光度或色度不應(yīng)大于鉛的限量標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度或色度。
若樣品經(jīng)處理，則鉛限量標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)同法處理。
5.2 定量測定
吸取10.0ml（或適量）樣品液和同量的試劑空白液，分別置于125ml分液漏斗中，各加1%硝酸至20ml。
吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0,0.1,0.3,0.5,0.7,1.0ml（分別相當(dāng)于0,1,3,5,7,10μg鉛）。分別置于125ml的分液漏斗中。各加1%硝酸至20ml。向樣品液、試劑空白液及鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液中各加入1ml 50%檸檬酸銨溶液，1ml 20%鹽酸羥胺溶液和2滴酚紅指示液，用氨水(1+1)調(diào)至紅色，再各加入2ml 10%氰化鉀溶液，混勻，各加5.0ml雙硫腙使用液，劇烈振搖1min，靜置分層后，三氯甲烷經(jīng)脫脂棉濾入1cm比色杯中，于波長510nm處，以零管調(diào)節(jié)點(diǎn)，測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5.3 計(jì)算
(A1-A2)×1000
C=-------------------------------- ………………… (2)
V2
m×------ ×1000
V1
式中：C-樣品中鉛的含量，mg/kg或mg/L;
A1-樣品液中鉛的含量，μg;
A2-試劑空白液中鉛的含量，μg;
m-樣品質(zhì)量（體積），g(ml);
V1-樣品處理后定容體積，ml;
V2-測定時(shí)所取樣品液體積，ml