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內(nèi)標(biāo)法：
1.定義：
內(nèi)標(biāo)法是一種間接或相對(duì)的校準(zhǔn)方法。在分析測(cè)定樣品中某組分含量時(shí)，選一與欲測(cè)組分相近但能完全分離的組分做內(nèi)標(biāo)物（內(nèi)標(biāo)物是樣品中沒(méi)有的組分），然后配制欲測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣得相對(duì)校正因子。再將內(nèi)標(biāo)物加入欲測(cè)組分的樣品中，進(jìn)樣后測(cè)得欲測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的定量參數(shù)。
2.內(nèi)標(biāo)物：
內(nèi)標(biāo)法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術(shù)。使用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，在樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它可被色譜柱所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測(cè)定內(nèi)標(biāo)物和待測(cè)組分的峰面積與相對(duì)響應(yīng)值，即可求出待測(cè)組分在樣品中的百分含量。采用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí)，內(nèi)標(biāo)物的選擇是一項(xiàng)十分重要的工作。理想地說(shuō)，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個(gè)能得到純樣的己知化合物，這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去，它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)（如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等）、色譜行為和響應(yīng)特征，最好是被分析物質(zhì)的一個(gè)同系物。當(dāng)然，在色譜分析條什下，內(nèi)標(biāo)物必須能與樣品中各組分充分分離。
3.選擇內(nèi)標(biāo)物的四個(gè)要求
（1）內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是該試樣中不存在的純物質(zhì)；
（2）它必須完全溶于試樣中，并與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；
（3）加入內(nèi)標(biāo)物的量應(yīng)接近于被測(cè)組分；
（4）色譜峰的位置應(yīng)與被測(cè)組分的色譜峰的位置相近，或在幾個(gè)被測(cè)組分色譜峰中間。
4.影響因素
在使用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí)，影響內(nèi)標(biāo)和被測(cè)組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學(xué)方面的、色譜方面的和儀器方面的三類(lèi)。由化學(xué)方面的原因產(chǎn)生的面積比的變化常常在分析重復(fù)樣品時(shí)出現(xiàn)。
化學(xué)方面的因素
（1）內(nèi)標(biāo)物在樣品里混合不好；
（2）內(nèi)標(biāo)物和樣品組分之間發(fā)生反應(yīng)；
（3）內(nèi)標(biāo)物純度可變等。
對(duì)于一個(gè)比較成熟的方法來(lái)說(shuō)，色譜方面的問(wèn)題發(fā)生的可能性更大一些，色譜上常見(jiàn)的一些問(wèn)題（如滲漏）對(duì)絕對(duì)面積的影響比較大，對(duì)面積比的影響則要小一些。
但如果絕對(duì)面積的變化已大到足以使面積比發(fā)生顯著變化的程度，那么一定有某個(gè)重要的色譜問(wèn)題存在，比如進(jìn)樣量改變太大，樣品組分濃度和內(nèi)標(biāo)濃度之間有很大的差別，檢測(cè)器非線(xiàn)性等。進(jìn)樣量應(yīng)足夠小并保持不變，這樣才不致于造成檢測(cè)器和積分裝置飽和。
如果認(rèn)為方法比較可靠，而色譜圖看來(lái)也是正常的話(huà)，應(yīng)著重檢查積分裝置和設(shè)置、斜率和峰寬定位。對(duì)積分裝置發(fā)生懷疑的最有力的證據(jù)是：面積比可變，而峰高比保持相對(duì)恒定。
5.優(yōu)點(diǎn)
內(nèi)標(biāo)法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)的一種方法，它在加入內(nèi)標(biāo)物后，按峰面積歸一法的分析方法進(jìn)行分析，這就避免了由于進(jìn)樣的一致性及樣品基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的偶然誤差。因而，它的分析精密度也是比較高的，是一種比較理想的定量分析方法。進(jìn)樣量的變化、色譜操作條件的微小變化對(duì)定量結(jié)果的影響不大，特別是在樣品前處理（如濃縮、萃取、衍生化等）前加入內(nèi)標(biāo)物，可部分補(bǔ)償欲測(cè)組分在樣品前處理時(shí)的損失。若要獲得很高的精密度的結(jié)果時(shí)，可以加入樹(shù)種內(nèi)標(biāo)物，以提高定量分析的精度。缺點(diǎn)：每次測(cè)定都需要用分析天平準(zhǔn)確稱(chēng)取內(nèi)標(biāo)物和樣品的質(zhì)量，故費(fèi)時(shí)麻煩。同時(shí)必須要有合適的標(biāo)樣及內(nèi)標(biāo)物才能進(jìn)行內(nèi)標(biāo)法定量分析。
外標(biāo)法：
1.定義
與內(nèi)標(biāo)法相比，外標(biāo)法不是把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入到被測(cè)樣品中，而是在與被測(cè)樣品相同的色譜條件下單獨(dú)測(cè)定，把得到的色譜峰面積與被測(cè)組分的色譜峰面積進(jìn)行比較求得被測(cè)組分的含量。外標(biāo)物與被測(cè)組分同為一種物質(zhì)但要求它有一定的純度，分析時(shí)外標(biāo)物的濃度應(yīng)與被測(cè)物濃度相接近，以利于定量分析的準(zhǔn)確性。
2.種類(lèi)
外標(biāo)法分為工作曲線(xiàn)法、外標(biāo)一點(diǎn)法。工作曲線(xiàn)法是用對(duì)照物質(zhì)配制一系列濃度的對(duì)照品溶液確定工作曲線(xiàn)，求出斜率、截距。在完全相同的條件下，準(zhǔn)確進(jìn)樣與對(duì)照品溶液相同體積的樣品溶液，根據(jù)待測(cè)組分的信號(hào)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出其濃度，或用回歸方程計(jì)算。
3.適用范圍
外標(biāo)法適用于常規(guī)分析，它用于衡量組分的分析也能得到滿(mǎn)意的結(jié)果。這個(gè)方法的精確度，在很大程度上取決于操作條件的控制。樣品分析的操作條件，必須嚴(yán)格控制于繪制校正曲線(xiàn)時(shí)的條件。當(dāng)峰高對(duì)操作條件的敏感性以及對(duì)拖尾峰、柱子超負(fù)荷和檢測(cè)器有大的響應(yīng)時(shí)，給出非線(xiàn)性的校正曲線(xiàn)，此時(shí)峰面積計(jì)算常�？梢缘玫礁玫慕Y(jié)果。不過(guò)，對(duì)重疊峰，難以準(zhǔn)確的測(cè)量峰面積，必須提高分離度才能達(dá)到預(yù)期的效果。
4.特點(diǎn)
外標(biāo)法誤差的來(lái)源，除了分離條件的變化之外，就是進(jìn)樣的重復(fù)性。使用注射器進(jìn)樣，外標(biāo)法的誤差大約在0.5%以?xún)?nèi)。但是，使用定量進(jìn)樣閥可獲得1%的精密度；若同時(shí)小心控制分離參數(shù)，分析精密度可達(dá)±0.25%。
外標(biāo)要求儀器重復(fù)性很?chē)?yán)格，適于大量的分析樣品，因?yàn)閮x器隨著使用會(huì)有所變化，因此需要定期進(jìn)行曲線(xiàn)校正。此法的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，計(jì)算方便，不需測(cè)量校正因子，適于自動(dòng)分析。但儀器的重現(xiàn)性和操作條件的穩(wěn)定性必須保證，否則，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)是測(cè)定的結(jié)果較為準(zhǔn)確，由于通過(guò)測(cè)量?jī)?nèi)標(biāo)物及被測(cè)組分的峰面積的相對(duì)值來(lái)進(jìn)行計(jì)算的，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內(nèi)標(biāo)法的缺點(diǎn)是操作程序較為麻煩，每次分析時(shí)內(nèi)標(biāo)物和試樣都要準(zhǔn)確稱(chēng)量，有時(shí)尋找合適的內(nèi)標(biāo)物也有困難。
外標(biāo)法就是用標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積或峰高與其對(duì)應(yīng)的濃度做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，測(cè)出樣品的峰面積或峰高，在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出其對(duì)應(yīng)的濃度，這是最常用的一種定量方法，外標(biāo)法簡(jiǎn)便，但進(jìn)樣量要求十分準(zhǔn)確，要嚴(yán)格控制在與標(biāo)準(zhǔn)物相同的操作條件下進(jìn)行，否則造成分析誤差，得不到準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果。
內(nèi)標(biāo)法是對(duì)應(yīng)外表法說(shuō)的，外標(biāo)法需要用樣品和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比，但是有時(shí)我們很難保證樣品和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)的體積是一樣的，畢竟要有誤差，這時(shí)候就用內(nèi)標(biāo)法，就是在外標(biāo)法的基礎(chǔ)上，在樣品和標(biāo)準(zhǔn)品里在加入一種物質(zhì)，通過(guò)加入物質(zhì)的峰面積或峰高的變化，就可以看出我們標(biāo)準(zhǔn)品和樣品進(jìn)樣體積的差別，但同時(shí)會(huì)引進(jìn)加入物質(zhì)的秤量誤差.所以一般用外標(biāo)法來(lái)定量，如果進(jìn)樣體積很難掌握，就用內(nèi)標(biāo)法，可以消除進(jìn)樣體積的誤差。
小結(jié)
內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)都是定量的一種方法而已，至于哪一種方法好與不好不能一概而論，做不同的分析，面對(duì)著不同的要求，再加上分析成本分析效率等等問(wèn)題，簡(jiǎn)單而有效進(jìn)行定量分析來(lái)滿(mǎn)足要求才是最重要的。
應(yīng)用外標(biāo)法能夠滿(mǎn)足要求，首選還是外標(biāo)法了，畢竟簡(jiǎn)單而省事。對(duì)于精密度要求比較高、結(jié)果準(zhǔn)確度會(huì)產(chǎn)生重大影響、實(shí)驗(yàn)室條件不是很理想的等等條件下，用內(nèi)標(biāo)法還是必要的。無(wú)論應(yīng)用那種方法，方法的驗(yàn)證和確認(rèn)都是很重要的，只要是按照程序經(jīng)過(guò)驗(yàn)證和確認(rèn)的方法，都有其應(yīng)用的空間的。
