1. Trizol試劑含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。

2. RNase污染的主要來源是操作過程中手和空氣中的浮沉，注重配帶手套，樣品盡可能蓋嚴(yán)。

3. 細胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會降低最后得率，因為一部分RNA會殘留在未裂解的細胞中。細胞裂解之后要看不見顆粒狀物質(zhì)（結(jié)締組織和骨除外）。在清洗和裂解細胞時最好在低溫下操作，防止在操作過程中釋放的內(nèi)源RNase降解了RNA。

4. 酵母和一些細菌由于細胞壁的特別結(jié)構(gòu)，可以加入Trizol試劑同時加入無RNase的玻璃珠并劇烈振蕩，使細胞裂解充分。

2-8℃ 避光保存一年。
【預(yù)備工作】
RNA酶（Rnase）是導(dǎo)致RNA降解最主要的物質(zhì)。此酶非常穩(wěn)定，在一些極端的條件下只可暫時失活，但限制因素去除后又迅速恢復(fù)活性。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白抑制劑不能使所有的Rnase完全失活。

1.它廣泛存在于人的皮膚上，因此制備RNA時必須戴手套

2.RNase的又一污染源是取液器。根據(jù)取液器制造商的要求對取液器進行處理。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部，可基本達到要求。

3. 塑料制品、玻璃和金屬物品的處理

塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。

處理的步驟如下：

（1）在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H₂O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物，須在通風(fēng)櫥中小心使用）

（2）將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H₂O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風(fēng)柜中37℃ 或室溫下處理過夜。

（3）將DEPC-H₂O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC- H₂O 處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。

（4）滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。

（5）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。