一 產(chǎn)品簡介與工作原理
CMT 應(yīng)用范圍廣,從小規(guī)模的農(nóng)場到大規(guī)模的奶業(yè)收購站、加工廠或者質(zhì)量控制實驗室都可用到。該試劑盒適用于牛奶、羊奶中廣譜抗生素的檢測,也可用于原奶、熱處理奶、奶粉中抗生素的檢測。CMT 的檢測原理是:CMT 檢測管中的培養(yǎng)基預(yù)先接種了嗜熱脂肪芽孢桿菌,并含有細菌生長所需的營養(yǎng)(如葡萄糖)以及pH指示劑(溴甲酚紫)。操作者無需添加其他營養(yǎng)成分,只需加入100ul樣品于檢測管中。將含有樣品的檢測管放入64±1℃水浴(或溫浴、加熱模塊)中加熱一段時間(時間長短視具體情況而定)。奶(或奶制品)在培養(yǎng)基中迅速擴散,若該樣品中不含有抑菌劑(或者抑菌劑的濃度低于檢測限),嗜熱脂肪芽孢桿菌將在培養(yǎng)基中生長,葡萄糖被分解后所產(chǎn)生的酸會改變pH指示劑的顏色,由紫色變?yōu)辄S色。相反,如果樣品中含有高于檢測限的抑菌劑,則嗜熱脂肪芽孢桿菌不會生長。pH指示劑的顏色保持不變,仍為紫色。如下圖:
二 注意事項
1. 防止交叉污染.保持工作臺的清潔.避免有可能影響水浴(溫浴)溫度穩(wěn)定的環(huán)境因素。避免在高溫、太陽直曬、空氣流動太快的工作區(qū)工作。
2.小心操作,避免劇烈的動作使檢測培養(yǎng)基變得松散。
3.不要使用過期的產(chǎn)品。
4.不要使用蒸溜水作為陰性對照。
三 檢查產(chǎn)品的有效性
在使用本產(chǎn)品之前,檢查附在試劑盒蓋內(nèi)側(cè)的溫度指示條。如果溫度指示條的顏色變成黑色,此產(chǎn)品不能使用。如果產(chǎn)品有明顯的損壞、脫水或污染,該產(chǎn)品也不能使用。該產(chǎn)品需要正確的儲藏,不正確的儲藏會損壞產(chǎn)品的性能。
四 試劑盒成分
1,96 孔板(可被分成6 小塊,每塊狀16個檢測孔)
2,有孔封口膜
3,顏色對照卡
五 所需其他材料(試劑盒沒有提供)
水浴鍋或者干燥培養(yǎng)箱。
六 試劑盒儲存條件和穩(wěn)定性
該試劑盒需要保存在黑暗的冷藏室中(+5/+16℃ 或者+41/+60F)。建議保存時不要拆開原包裝。防止使產(chǎn)品冷凍、陽光直曬和保存在15℃以上。防止儲存溫度的驟然變化(儲存溫度的驟然變化會引起檢測培養(yǎng)基產(chǎn)生氣泡)。 不正確的儲存條件會影響產(chǎn)品的檢測性能和有效期。在正確的儲存條件下,本產(chǎn)品的有效期為12個月。不要使用過期產(chǎn)品。
使用指南
a. 正確對應(yīng)所檢樣品與檢測孔,做好實驗記錄以免混淆。
b. 每快微孔板共有96個檢測孔,可被分成6小塊(每塊狀16個檢測孔)。小心掰開所需數(shù)量的檢測孔(用剪刀剪開封口鋁箔薄膜)。注意不要損壞剩余檢測孔上的封口鋁箔薄膜(封口鋁箔薄膜的損壞會導(dǎo)致孔內(nèi)培養(yǎng)基的脫水)。
c. 撕開待用檢測板上的封口鋁箔薄膜。
d. 用加樣器向每個檢測孔加入100ul待檢樣本。請使用一次性的槍頭,避免相鄰檢測孔之間由于樣品潑澗、溢出所導(dǎo)致的交叉污染。
e. 使用試劑盒提供的封口膜將檢測孔口封住.
f. 將檢測板/小塊放置在預(yù)熱的(64±0.5℃)水浴鍋(或其他的溫浴裝置)中溫浴3小時。盡量保證溫浴溫度的恒定,溫度的波動會導(dǎo)致溫浴時間的延長。
為提高檢測的靈敏度,當(dāng)陰性對照改變顏色時判讀檢測結(jié)果。強烈建議每次實驗設(shè)立陰性、陽性對照。陰性對照為100ul 沒有抗生素殘留的牛奶(或羊奶),陽性對照為僅含有青霉素G(濃度為MRL)的牛奶(或羊奶)。
質(zhì)量控制
所有制造該試劑盒的原材料和終產(chǎn)品都經(jīng)過Copan公司嚴格的質(zhì)量控制。
CMT 具有很廣的檢測范圍。它能檢測內(nèi)酯 磺胺類抗生素、四環(huán)類抗生素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、胺基糖苷類抗生素、黃胺類抗生素、三甲氧芐二胺嘧啶以及其他抗生素。
結(jié)果判讀
顏色判讀
在64±0.5℃條件下溫浴3 小時后,從檢測孔底端和側(cè)面判讀顏色變化?筛鶕(jù)試劑盒提供的顏色對照卡來判斷檢測結(jié)果。
黃色表明該樣品沒有抗生素殘留或抗生素殘留的含量低于試劑盒的檢測限(陰性)
紫色表明該樣品中含有抗生素殘留,且濃度高于試劑盒的檢測限(陽性)。
如果顏色介于黃色和紫色之間,則表明該樣品可能不含有抗生素殘留或抗生素殘留的含量低于試劑盒的檢測限(部分陽性)。請參照顏色對照卡來判斷結(jié)果。
Copan CMT 顏色對照卡:
檢測限
該試劑盒對于抗生素類的檢測限為4ppb。
取樣操作指南
本試劑盒含有96個檢測孔, 每次最少可以分成16個檢測孔以備使用。如果待檢樣品數(shù)量不大,可以選擇Copan單孔檢測試劑盒以避免不必要的浪費。
在取樣階段,必須小心謹慎,以避免污染。使用干凈的取樣和送樣設(shè)備,樣品檢測應(yīng)在取樣后的小時內(nèi)檢測,同時樣品要冷藏。樣品中的保鮮劑可能會抑制微生物的生長,從而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,所以,含有保鮮劑的樣品不宜檢驗。
在取樣過程中,沒有必要戴手套,但是手要洗干凈。注意在操作中不要污染多次性取樣送樣設(shè)備(比如多用注射器)。
充分混勻待檢樣品和對照后,使用一次性的槍頭將樣品加入到檢測孔中。小心操作,避免潑澗、溢出和相鄰檢測孔間的交叉污染。
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