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基因克隆技術(shù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
基因克隆技術(shù)在體外將DNA分子片段與載體DNA片段連接,轉(zhuǎn)入細(xì)胞獲得大量拷貝的過(guò)程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步驟包括:制備目的基因→將目的基因與載體用限制性內(nèi)切酶切割和連接,制成DNA重組→導(dǎo)入宿主細(xì)胞→篩選、鑒定→擴(kuò)增和表達(dá)。載體(vecors)在細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制,并帶動(dòng)重組的分子片段共同增殖,從而產(chǎn)生大量的DNA分子片段。主要目的是獲得某一基因或NDA片段的大量拷貝,有了這些與親本分子完全相同的分子克隆,就可以深入分析基因的結(jié)構(gòu)與功能,隨著引入的DNA片段不同,有兩種DNA庫(kù),一種是基因組文庫(kù)(genomic library),另一種是cDNA庫(kù)。
 
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