1989年，Horton等人提出了SOE法（Gene splicing by over lap extension），即通 過復制時DNA鏈的交錯延伸不實現(xiàn)基因拼接，分四步進行。
�。�1）引物設(shè)計：引物a和d是常規(guī)引物；b的左半段為常規(guī)引物，右半段為基因Ⅱ的引 物序列；c同理；則b和c的部分堿基可互補配對。
�。�2）基因I、Ⅱ分別擴增，產(chǎn)物相應(yīng)為片段A、B和C、D。
�。�3）兩種產(chǎn)物混合，經(jīng)變性及退火處理，A鏈和D鏈部分堿基互補配對，成雜交鏈。
�。�4）在DNApolymeraseI作用下，A和D鏈互為引物和模板，合成出A'D'鏈，即為基因I 和基因Ⅱ的接接產(chǎn)物。若在引物中引入突變的堿基序列，則在接接產(chǎn)物中，將按預(yù)先 設(shè)計要求出現(xiàn)定點突變。
