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聚丙烯酰胺凝膠電泳

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
聚丙烯酰胺凝膠電泳適宜分離鑒定低分子量蛋白質(zhì)、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分 析.其裝載的樣品量大,回收DNA純度高.長度僅相差0.2%(即500bp中的1bp)的核苷酸 分子即能分離.
  聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺單體,在催化劑TEMED(N,N,N,N'一四甲基乙二胺)和 過硫酸銨的作用下,丙烯酰胺聚合形成長鏈,聚丙烯酰胺鏈在交聯(lián)劑,N,N'一亞甲 雙丙烯酰胺參與下,聚丙烯胺鏈與鏈之間交叉聯(lián)接而形成凝膠.
  聚丙烯酰胺凝膠孔徑的大小是由丙烯酰胺的濃度決定的。聚丙烯酰胺凝膠電泳的材料有:
  1.電泳儀器:電泳儀,垂直電泳槽及其附件.
  2.30%丙烯酰胺
  丙烯酰胺,29克
  N,N'一亞甲基雙丙烯酰胺,1克
  H2O,加至100ml
  裝于棕色瓶內(nèi),4℃可保存二個月.
  3.10%過硫酸銨
  過硫酰銨,1克
  加水至,10ml
  4℃可保存一周,-20℃可保存一個月.
  4.1XTBE電泳緩沖液
  5.TEMED(四甲基乙烯基二胺)
 
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