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基因表達(dá)系列分析(SAGE)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
基因表達(dá)系列分析(SAGE)是通過(guò)快速和詳細(xì)分析成千上萬(wàn)個(gè)EST(express sequenced tags)來(lái)尋找出表達(dá)豐富度不同的SAGE標(biāo)簽序列。再次訪法中,通過(guò)限制性酶切可以產(chǎn)生非常短的cDNA(10-14bp)標(biāo)簽,并通過(guò)PCR擴(kuò)增和連接,隨后對(duì)連接題進(jìn)行測(cè)序。SAGE大大簡(jiǎn)化和加快了3’端表達(dá)序列標(biāo)簽的收集和測(cè)序。同DD一樣,SAGE是一個(gè)“開(kāi)放”的系統(tǒng),可以發(fā)現(xiàn)新的未知的序列。在進(jìn)行標(biāo)本的比較之前,SAGE在cDNA的產(chǎn)生和處理上需要較多個(gè)步驟。由于SAGE是一個(gè)依賴DNA測(cè)序的基因計(jì)量方法,它對(duì)基因表達(dá)的測(cè)定比DD更加量化。由于需要進(jìn)行大量的測(cè)序反應(yīng),所以費(fèi)用因素使大多數(shù)研究機(jī)構(gòu)對(duì)其廣泛應(yīng)用的主要限制。
 
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