準(zhǔn)確度
準(zhǔn)確度是反映方法系統(tǒng)誤差和隨機誤差的綜合指標(biāo)。檢驗準(zhǔn)確度可采用以下幾個方法:
一、是使用標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)進行分析測定,比較測定值與保證值,其絕對誤差或相對誤差應(yīng)符合方法規(guī)定的要求。
通常應(yīng)完成1—2個濃度水平的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測定,每個濃度水平要求采用至少6份同樣的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行測定,計算測定結(jié)果的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。準(zhǔn)確度(%)=平均檢測濃度/標(biāo)示濃度×100。
二、是在沒有有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)情況下,應(yīng)在樣品基質(zhì)中添加分析物測定回收率。應(yīng)至少選擇3個添加濃度,并且包含一定的濃度范圍,定量限或靠近定量限的濃度為必選濃度,如果樣品具有容許限,該容許限也是必選濃度。每個濃度水平至少平行測定6次,計算測量結(jié)果的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。回收率(%)=(加標(biāo)試樣測定值一試樣測定值)/添加濃度×100。對于有機待測物,回收率指標(biāo)應(yīng)滿足表1的要求;對于元素分析,回收率指標(biāo)應(yīng)在90%~110%之間。
三、是對同一樣品用不同原理的分析方法測試比對。不同待測物濃度范圍內(nèi)回收率要求不同。
精密度
精密度是指在規(guī)定條件下,相互獨立的測試結(jié)果之間的一致程度。精密度包括方法重復(fù)性和方法重現(xiàn)性兩個分指標(biāo)。
重復(fù)性:是在重復(fù)性條件下,相互獨立的測試結(jié)果之間的一致程度。重復(fù)性條件是指在同一實驗室,由同一操作者使用相同設(shè)備,按相同的測試方法,并在短時間內(nèi)對同一被測對象取得相互獨立測試結(jié)果的條件。重復(fù)性表征了該方法實驗室內(nèi)的精密度。
制定的標(biāo)準(zhǔn)方法必須進行方法的精密度試驗,以考察其是否精確可靠。重復(fù)性試驗過程中,選擇3個不同濃度水平樣品,每個濃度水平至少6次平行測定,計算出平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)符合要求。
重現(xiàn)性:是在再現(xiàn)性條件下,測試結(jié)果之間的一致程度。再現(xiàn)性條件是在不同實驗室,由不同的操作者使用不同的設(shè)備,按相同的測試方法,從同一被測對象取得測試結(jié)果的條件。
再現(xiàn)性表征了該方法在實驗室間的精密度,用來確保該方法能夠在不同實驗室中應(yīng)用。再現(xiàn)性實驗過程中,必須選擇至少
3個不同濃度水平或加標(biāo)濃度水平樣品,定世限或靠近定量限的濃度為必選濃度,如果樣品具有容許限,該容許限也是必選濃度,平行雙份,每份平行測定至少6次。
對各實驗室的測定數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,計算總平均值、再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差和再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差指標(biāo)應(yīng)符合要求。
線性
分析方法的線性用來表征待測物濃度或量與響應(yīng)值之間的關(guān)系,其作用就是在給定的濃度范圍里,通過線性關(guān)系可以直接或通過數(shù)學(xué)公式得到檢測結(jié)果。方法的濃度范圍應(yīng)該盡可能覆蓋一個數(shù)量級,至少作5個點(不包括空白),測試溶液中被測組分濃度應(yīng)在線性濃度范圍內(nèi)。對于篩選方法,線性相關(guān)系數(shù)值不應(yīng)低于0.98,對于確證方法,線性相關(guān)系數(shù)值不應(yīng)低于0.99。
檢測限和定量限
檢測限和定量限是表征方法檢測能力的兩個重要指標(biāo)。檢測限的確定有以下幾種方式:
(1)至少20次平行測定空白樣品所得的平均響應(yīng)信號值加上平行測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍,對應(yīng)的樣品分析物濃度或含量稱為該方法的檢測限。
(2)對于分光光度法,以扣除空白值后的與0.01吸光度相對應(yīng)的濃度值為檢測限。
(3)色譜分析的檢測限系指檢測器恰能產(chǎn)生與噪聲相區(qū)別的響應(yīng)信號時所需要進入色譜柱的物質(zhì)的最小量,一般將其定為3倍信噪比響應(yīng)值對應(yīng)的樣品分析物濃度或含量。
至少20次平行測定空白樣品所得的平均響應(yīng)信號值加上平行測定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍,對應(yīng)的樣品分析物濃度或含量稱該方法的定量限。
特異性
特異性是指方法區(qū)分待測分析物和其他干擾物質(zhì)(如異構(gòu)體、代謝物、降解產(chǎn)物、內(nèi)源性物質(zhì)、基質(zhì)成分等)的能力。表征了方法可以在一種復(fù)雜混合物中測定分析物的能力,同時又不干擾這種混合物(或樣品)中的其他成分。
耐變性
耐變性指分析方法具有對可變試驗因素的抗干擾能力,當(dāng)測定條件發(fā)生細小變動時,方法具有一定的保持測定結(jié)果不受影響的承受程度。
方法耐變性的檢驗通常選擇樣品預(yù)處理、凈化、分析過程等可能影響測定結(jié)果的因素進行預(yù)試驗,比如試劑來源和保存時間、溶劑、標(biāo)準(zhǔn)、樣品提取物、加熱速率、溫度、pH值,以及許多其他實驗室可能出現(xiàn)的因素。
不確定度
不確定度是指由于測量誤差的存在而對被測量值不能肯定的程度,是表征被測量的真值所處的量值范圍的評定。不確定度包含若干分量,是由隨機因素引起的分量和由系統(tǒng)因素引起的分量的綜合。
化學(xué)測試過程是一個復(fù)雜的過程,不確定度來源包括方法、取樣、存放條件、提取條件、環(huán)境條件、測量條件、儀器效應(yīng)、樣品效應(yīng)、空白校正、試劑純度、化學(xué)計算、操作者的影響和隨機效應(yīng)等。在實踐中,應(yīng)依據(jù)中華人民共和國國家計量技術(shù)規(guī)范,選取重要的不確定度來源進行評定。估計和控制化學(xué)測試過程的不確定度分量,保證溯源鏈的連續(xù)性,是保證檢測結(jié)果質(zhì)量的關(guān)鍵。